Vincenzo Galilei werd rond 1520 geboren in Santa Maria a Monte in de Arno vallei. Hij was lutanist en muziektheoreticus.

Na een studie in Venetië onder leiding van Gioseffo Zarlino (1517-1590), keerde hij terug naar Pisa en trouwde in 1562 met de jonge Giulia Ammannati (1538-1620). Uit hun huwelijk werden de volgende kinderen geboren: Galileo (1564), Benedetto (?), Virginia (1573), Anna (?), Michelangelo (1575), Livia (1578) en misschien nog een jongste dochter, Lena.

In 1574 verhuisde de familie Galilei naar Florence, waar Vincenzo, die zich daar al enkele jaren eerder had gevestigd, zijn muziekstudie kon voortzetten, vooral dankzij de hulp van graaf Giovanni Bardi (1534-1612). Bardi had de Camerata Fiorentina (of toepasselijker de’ Bardi) gesponsord, wier optredens de superioriteit van monodische zang aan polyfonie hadden vastgesteld en hadden bijgedragen aan de verandering in smaak die zou leiden tot de geboorte van de lyrische opera.

Vincenzo zette zijn muziektheorieën vooral uiteen in de volgende werken: Fronimo. Dialogo nel quale si contengono le vere et necessarie regole del intavolare la musica nel liuto (Venetië, 1568); Dialogo di Vincentio Galilei della musica antica et della moderna (Florence, 1581); Discorso di Vincentio Galilei intorno alle opere di Gioseffo Zarlino et altri importanti particolari attenenti alla musica (Florence, 1589).