Vincenzo Galilei nasceu por volta de 1520 em Santa Maria a Monte, no Vale do Arno. Foi lutanista e teórico da música.

Após estudar em Veneza sob a orientação de Gioseffo Zarlino (1517-1590), voltou a Pisa e em 1562 casou-se com a jovem Giulia Ammannati (1538-1620). Os filhos nascidos de seu casamento foram Galileu (1564), Benedetto (?), Virginia (1573), Anna (?), Michelangelo (1575), Livia (1578) e talvez uma filha mais nova chamada Lena.

Em 1574 a família Galilei se mudou para Florença, onde Vincenzo, que já havia se estabelecido lá alguns anos antes, pôde continuar seus estudos musicais graças principalmente à ajuda do Conde Giovanni Bardi (1534-1612). Bardi tinha patrocinado a Camerata Fiorentina (ou mais adequadamente de’ Bardi), cujas performances tinham estabelecido a superioridade do canto monódico à polifonia e contribuído para a mudança de gosto que levaria ao nascimento da ópera lírica.

Vincenzo expôs as suas teorias musicais principalmente nas obras seguintes: Fronimo. Dialogo nel quale si contengono le vere et necessarie regole del intavolare la musica nel liuto (Veneza, 1568); Dialogo di Vincentio Galilei della musica antica et della moderna (Florença, 1581); Discorso di Vincentio Galilei intorno alle opere di Gioseffo Zarlino et altri importanti particolari attenenti alla musica (Florença, 1589).