System Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System umożliwia szybki i łatwy kolorymetryczny pomiar proliferacji i żywotności komórek w formacie 96 dołków, bez izotopów radioaktywnych i rozpuszczalników organicznych. System Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System ma również zastosowanie w testach cytotoksyczności i inhibicji, gdzie produkcja barwnika zmniejsza się, a nie zwiększa.

Atest kolorymetryczny oparty jest na rozszczepieniu soli tetrazolowej WST-1 do barwnika klasy formazanowej przez mitochondrialną reduktazę bursztynianowo-tetrazolową w żywych komórkach. W miarę proliferacji komórek więcej WST-1 jest przekształcane do produktu formazanu. Ilość barwnika formazanowego jest bezpośrednio związana z liczbą aktywnych metabolicznie komórek i może być określona ilościowo poprzez pomiar absorbancji przy 420-480 nm (Amax 450 nm) w czytniku płytek wielodołkowych.

Protokół niewymagający wysiłku

System Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System nie wymaga żadnych etapów mycia, zbierania lub solubilizacji. Cała procedura, od hodowli komórek do analizy danych, może być przeprowadzona przy użyciu czytnika płytek wielodołkowych w tej samej 96-dołkowej płytce.

Po wyhodowaniu komórek, test może być zakończony w ciągu około 1 godziny. Wystarczy dodać Premixed WST-1 Cell Proliferation Reagent do płytki, hodować komórki przez co najmniej 30 minut w nawilżonej atmosferze (do 4 godzin, w zależności od typu i gęstości komórek) i zmierzyć absorbancję. Zabarwiony produkt jest generowany w sposób ciągły, dzięki czemu można monitorować postęp eksperymentu w czasie poprzez wielokrotne odczytywanie płytki i jej powrót do inkubatora w celu dalszego rozwoju. Eliminuje to zgadywanie i zapewnia, że optymalny punkt końcowy testu nie zostanie przeoczony.

Stabilne odczynniki

W przeciwieństwie do tradycyjnych odczynników do testów WST-1, które mogą być przechowywane tylko przez trzy dni w temperaturze 4°C lub jeden miesiąc w temperaturze -20°C, wstępnie zmieszany odczynnik do proliferacji komórek WST-1 został opracowany w celu zwiększenia stabilności: może być przechowywany przez dwa tygodnie w temperaturze 4°C lub jeden rok w temperaturze -20°C. Jest on dostarczany jako gotowy do użycia roztwór zawierający WST-1 i odczynnik sprzęgający elektrony, rozcieńczony w sterylnym roztworze soli fizjologicznej buforowanej fosforanami.

Nieradioaktywny, kolorymetryczny test

Wiele testów proliferacji komórek opiera się na pomiarach wychwytu znakowanych radioaktywnie nukleozydów podczas syntezy DNA. Test Premixed WST-1 Cell Proliferation Reagent jest nieradioaktywny, co zwiększa wygodę i bezpieczeństwo laboratorium. Ponadto, Premixed WST-1 Cell Proliferation Reagent jest wysoce rozpuszczalny w wodzie w porównaniu z innymi solami tetrazolowymi używanymi w podobnych testach, które mogą wymagać środków powierzchniowo czynnych lub rozpuszczalników organicznych do rozpuszczenia.

Premixed WST-1 Cell Proliferation Reagent uprości i usprawni Twoje testy proliferacji komórek. Prosty, jednorozpuszczalnikowy protokół oszczędza czas i jest łatwy w użyciu w formacie płytek 96-dołkowych. Płytki mogą być odczytane i zwrócone do inkubatora w celu dalszego rozwoju, co upraszcza eksperymenty czasowe.

.