Il sistema Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System permette una misurazione colorimetrica facile e veloce della proliferazione e vitalità cellulare in un formato a 96 pozzetti, senza isotopi radioattivi o solventi organici. Il Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System è anche applicabile alla citotossicità e ai saggi inibitori, dove la produzione di colorante diminuisce piuttosto che aumentare.

Il saggio colorimetrico si basa sulla scissione del sale di tetrazolio WST-1 in un colorante di classe formazan da parte della succinato-tetrazolio reduttasi mitocondriale nelle cellule vitali. Man mano che le cellule proliferano, più WST-1 viene convertito nel prodotto formazan. La quantità di tintura di formazan è direttamente correlata al numero di cellule metabolicamente attive e può essere quantificata misurando l’assorbanza a 420-480 nm (Amax 450 nm) in un lettore di piastre multiwell.

Un protocollo senza sforzo

Con il sistema Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System non sono richiesti lavaggi, raccolta o solubilizzazione. L’intera procedura, dalla coltura delle cellule all’analisi dei dati, può essere eseguita con un lettore di piastre multiwell nella stessa piastra a 96 pozzetti.

Una volta che le cellule sono coltivate, il test può essere completato in circa 1 ora. Basta aggiungere il reagente di proliferazione cellulare premiscelato WST-1 alla piastra, coltivare le cellule per almeno 30 minuti in un’atmosfera umidificata (fino a 4 ore, a seconda del tipo e della densità delle cellule) e misurare l’assorbanza. Il prodotto colorato viene generato continuamente, quindi puoi monitorare il progresso del tuo esperimento nel tempo leggendo ripetutamente la piastra e riportandola nell’incubatore per un ulteriore sviluppo. Questo elimina le congetture e assicura che l’endpoint ottimale del test non venga trascurato.

Reagenti stabili

A differenza dei tradizionali reagenti per il test WST-1, che possono essere conservati solo per tre giorni a 4°C o un mese a -20°C, il reagente di proliferazione cellulare WST-1 premiscelato è stato formulato per una maggiore stabilità: può essere conservato per due settimane a 4°C o un anno a -20°C. Viene fornito come soluzione pronta all’uso contenente WST-1 e un reagente di accoppiamento di elettroni, diluito in soluzione salina tampone fosfato sterile.

Saggio colorimetrico non radioattivo

Molti saggi di proliferazione cellulare sono basati sulla misurazione dell’assorbimento di nucleosidi marcati radioattivamente durante la sintesi del DNA. Il saggio Premixed WST-1 Cell Proliferation Reagent non è radioattivo, il che aumenta la convenienza e la sicurezza del laboratorio. Inoltre, il reagente di proliferazione cellulare Premixed WST-1 è altamente solubile in acqua rispetto ad altri sali di tetrazolio utilizzati in saggi simili, che possono richiedere tensioattivi o solventi organici per la dissoluzione.

Il reagente di proliferazione cellulare Premixed WST-1 semplifica e ottimizza i vostri saggi di proliferazione cellulare. Il semplice protocollo di una sola soluzione fa risparmiare tempo ed è facile da usare in un formato di piastra a 96 pozzetti. Le piastre possono essere lette e rimesse nell’incubatore per un ulteriore sviluppo, per semplificare gli esperimenti a tempo.