Vincenzo Galilei nació hacia 1520 en Santa Maria a Monte, en el valle del Arno. Fue lutanista y teórico de la música.

Después de estudiar en Venecia bajo la dirección de Gioseffo Zarlino (1517-1590), regresó a Pisa y en 1562 se casó con la joven Giulia Ammannati (1538-1620). Los hijos nacidos de su matrimonio fueron Galileo (1564), Benedetto (?), Virginia (1573), Anna (?), Michelangelo (1575), Livia (1578) y quizás una hija menor llamada Lena.

En 1574 la familia Galilei se trasladó a Florencia, donde Vincenzo, que ya se había establecido allí unos años antes, pudo continuar sus estudios de música gracias principalmente a la ayuda del conde Giovanni Bardi (1534-1612). Bardi había patrocinado la Camerata Fiorentina (o más apropiadamente de’ Bardi), cuyas actuaciones habían establecido la superioridad del canto monódico sobre la polifonía y contribuido al cambio de gusto que llevaría al nacimiento de la ópera lírica.

Vincenzo expuso sus teorías musicales principalmente en las siguientes obras: Fronimo. Dialogo nel quale si contengono le vere e necessarie regole del intavolare la musica nel liuto (Venecia, 1568); Dialogo di Vincentio Galilei della musica antica e della moderna (Florencia, 1581); Discorso di Vincentio Galilei intorno alle opere di Gioseffo Zarlino et altri importanti particolari attenenti alla musica (Florencia, 1589).