TY – JOUR

T1 – Strukturell grund för substratbindning i WsaF, ett rhamnosyltransferas från Geobacillus stearothermophilus

AU – Steiner, Kerstin

AU – Hageluken, Gregor

AU – Messner, Paul

AU – Schaeffer, Christina

AU – Naismith, James Henderson

PY – 2010/3/26

Y1 – 2010/3/26

N2 – Polymerer av kolhydrater är medicinskt och industriellt viktiga. S-skiktet hos många grampositiva organismer består av protein- och kolhydratpolymerer och bildar en nästan parakristallin matris på cellytan. Denna grupp är inte bara viktig för bakterierna utan kan också användas vid tillverkning av kommersiellt viktiga polysackarider och glykokonjugater. S-lagerglykoproteinglykanen från Geobacillus stearothermophilus NRS 2004/3a består huvudsakligen av upprepade enheter av tre rhamnosocker som är bundna med alfa-1,3-, alfa-1,2- och beta-1,2-bindningar. Bildandet av beta-1,2-bindningen katalyseras av enzymet WsaF. Den rationella användningen av detta system hindras av att WsaF och andra enzymer i vägen delar mycket liten homologi med andra enzymer. Vi rapporterar den strukturella och biokemiska karakteriseringen av WsaF, det första rhamnosyltransferas som karakteriserats. Det strukturella arbetet underlättades av metoden för reducering av ytentropi. Enzymet har två domäner, den N-terminala domänen, som binder acceptorn (den växande rhamnankedjan), och den C-terminala domänen, som binder substratet (dTDP-beta-L-rhamnos). Strukturen av WsaF bunden till dTDP och dTDP-beta-L-rhamnos i kombination med biokemisk analys identifierar de rester som ligger till grund för katalys och substratigenkänning. Vi har konstruerat och testat genom platsstyrd mutagenes en modell för acceptorerkännande. (C) 2010 Elsevier Ltd. Alla rättigheter förbehållna.

AB – Kolhydratpolymerer är medicinskt och industriellt viktiga. S-skiktet hos många grampositiva organismer består av protein- och kolhydratpolymerer och bildar en nästan parakristallin matris på cellytan. Denna grupp är inte bara viktig för bakterierna utan kan också användas vid tillverkning av kommersiellt viktiga polysackarider och glykokonjugater. S-lagerglykoproteinglykanen från Geobacillus stearothermophilus NRS 2004/3a består huvudsakligen av upprepade enheter av tre rhamnosocker som är bundna med alfa-1,3-, alfa-1,2- och beta-1,2-bindningar. Bildandet av beta-1,2-bindningen katalyseras av enzymet WsaF. Den rationella användningen av detta system hindras av att WsaF och andra enzymer i vägen delar mycket liten homologi med andra enzymer. Vi rapporterar den strukturella och biokemiska karakteriseringen av WsaF, det första rhamnosyltransferas som karakteriserats. Det strukturella arbetet underlättades av metoden för reducering av ytentropi. Enzymet har två domäner, den N-terminala domänen, som binder acceptorn (den växande rhamnankedjan), och den C-terminala domänen, som binder substratet (dTDP-beta-L-rhamnos). Strukturen av WsaF bunden till dTDP och dTDP-beta-L-rhamnos i kombination med biokemisk analys identifierar de rester som ligger till grund för katalys och substratigenkänning. Vi har konstruerat och testat genom platsstyrd mutagenes en modell för acceptorerkännande. (C) 2010 Elsevier Ltd. All rights reserved.

KW – Kristallstruktur

KW – Geobacillus stearothermophilus

KW – Rhamnosyltransferas

KW – S-lagersproteinglykosylering

KW – Biosyntes av glykoproteinglykaner

KW – Biosyntes av glykoproteinglykaner

KW – S-lagersproteiner

KW – Biosyntes av glykaner. Mannosyltreansferas pima

KW – Glykogen-syntas

KW – Diffraktionsdata

KW – Gen-cluster

KW – Familj GT4

KW – Glykosyltransferaser

KW – Katalys

KW – Sekvens

UR – http://www.scopus.com/inward/record.url?scp=77349090654&partnerID=8YFLogxK