Metode

Designul studiului și zona de studiu

Acesta a fost un studiu transversal efectuat în perioada iunie-septembrie 2018 în Amana, Temeke și Kinondoni Regional Referral Hospitals din Dar es salaam, Tanzania. Am înrolat consecutiv 158 pacienți cu solicitări de testare Widal de la medici după ce am obținut un consimțământ verbal și scris în cunoștință de cauză.

Populația studiului

Pacienți cu vârste cuprinse între 5-82 ani care frecventează clinica la spitalul de referință din Dar es Salaam suspectați de febră tifoidă de către medicii lor curanți.

Colectarea și procesarea probelor

Thnologul bine instruit a colectat aseptic 5-10 ml de probe de sânge venos în funcție de vârsta participantului. 3-8 ml în funcție de vârstă au fost inoculați direct în bulion și 2-3 ml au fost colectați în tuburi vacutainer simple pentru widal.

O lingură de probă de scaun a fost colectată în recipiente curate.

Testare de laborator tifos

Testul Widal

Am folosit ser pentru a detecta antigenele specifice O și H. În eprubete s-a adăugat o picătură de antigene O și antigene H, în cantitate egală în toate eprubetele. Pe baza manualului producătorului, un titru de anticorpi de 1:80 și mai mare pentru anticorpii anti TO și de 1:160 și mai mare pentru anticorpii anti TH a fost luat ca valoare limită pentru a indica o infecție recentă de febră tifoidă.

Cultura de sol

Am inoculat pe plăci de agar MacConkey și xiloză, dezoxicolat de lizină și am incubat la 37 °C timp de 48 h. Am supus coloniile suspecte de Salmonella la colorația Gram și le-am identificat prezumtiv cu ajutorul agarului Kligler Iron Agar (Difco™), testului de urează (Himedia ltd. India), Indole, Citrat de oxidază, Motilitate.

Culturi de sânge

Buratul a fost preparat din 10% agar-agar ox-gall/Columbia în apă distilată. (Adăugați 5 ml de sânge integral la 50 ml de mediu steril de ox-bilet. După incubarea peste noapte, s-a efectuat subcultură și identificarea biochimică din 10% ox-gall/Columbia pe agar XLD (OXOID, Anglia).

În agar XLD: salmonella producătoare de H2S a format colonii roșu-roz de 3-5 mm în diametru cu centrul negru.

În agar MacConkey: salmonella a produs colonii de culoare palidă care nu fermentează lactoza. Toate aceste medii și bulioane folosite vor fi pregătite conform instrucțiunilor producătorului.

Identificare biochimică

Salmonella a fost identificată prezumtiv folosind Agar Kligler Iron, (Difco™), testul urează (Himedia ltd. India), Indole, Citrat Oxidază, Motilitate.

Control de calitate

Procedurile operaționale standard au fost urmate în timpul procesării fiecărei probe. Toate instrumentele folosite pentru procesarea probelor au fost verificate în fiecare dimineață pentru buna funcționare.

E. coli ATCC 25922 a fost folosit ca tulpină de referință.

Analiză și gestionare a datelor

Am verificat încrucișat și codificat datele privind rezultatele de laborator înainte de a le introduce în programul informatic. Datele au fost curățate și analizate cu ajutorul pachetului statistic pentru științe sociale (SPSS) versiunea 23.0 (SPSS software Chicago Inc., SUA). Rezumarea datelor a fost făcută folosind distribuția de frecvență și tabele cu două căi; asocierea dintre alte variabile independente și dependente a fost determinată folosind Chi-pătrat sau Testul kappa. Valoarea kappa, < 0,09; 0,1-0,19; 0,2-0,49; și > 0,5 au fost considerate un acord slab, moderat, puternic și, respectiv, aproape perfect. valoarea p de < 0,05 a fost considerată semnificativă din punct de vedere statistic.

Rezultate

Caracteristicile participanților

Am înrolat 158 de pacienți. Vârsta mediană a fost de 34 de ani, media 31 și femei 62%. Participanții aveau fie studii secundare 43,8%, fie studii de nivel inferior 41,2%. Majoritatea participanților erau fie căsătoriți 62 (40%), fie divorțați 42 (27,1%). Răspunsul pacienților privind nefolosirea antibioticelor în 2 săptămâni, 1 săptămână, respectiv 3 zile, 93 (58,5%), 47 (28,9%) 13 (8,2%). La momentul 2 săptămâni, 1 săptămână și, respectiv, 3 zile răspunsul bolnavilor a fost de 74 (46,4%), 47 (29,6%) și 7 (4,4%) (tabelul 1).

8 dintre cei 93 de non-utilizatori de antibiotice cu 2 săptămâni înainte de vizita la spital, 8 au avut hemocultură pozitivă. 1 din 13 utilizatori de antibiotice cu 1 săptămână înainte de a veni la spital a fost hemocultură pozitivă și 2 din 46 care au folosit antibiotice în 2 săptămâni înainte de a veni la spital au fost hemoculturi pozitive.

Durata medie (deviație standard) a bolii a fost de 6 (4). Dintre cei 74 de pacienți care s-au îmbolnăvit în decurs de 1 săptămână, doar 8 au fost pozitiv la hemocultură, 47 în 2 săptămâni doar 6 au fost pozitiv și dintre cei 25 care au început să se simtă rău în 3 săptămâni doar 3 au fost pozitiv la hemocultură.

Sensibilitatea, specificitatea și valorile predictive ale culturii de Widal și de scaun în diagnosticarea febrei tifoide folosind hemocultura ca metodă standard

Din cele 158 de probe de sânge cultivate, 16 (10,1%) au fost pozitive pentru S. typhi. Astfel, prevalența globală a febrei tifoide în populația studiată a fost de 10,1%. Prevalența conform Widal a fost de 80,5%, în timp ce prevalența conform culturii de scaun a fost de 11% în cazul în care izolatele din scaun nu au fost serotipate (tabelul 2).

În comparație cu hemocultura, cultura de scaun a avut o sensibilitate, specificitate, valoare predictivă pozitivă (VPP) și valoare predictivă negativă (VPP) de 31.25%, 91, 5%, 29,4% și, respectiv, 92,2%, în timp ce testul Widal a avut o sensibilitate, o specificitate, o VPP și o VAN de 81,5%, 18,3%, 10,1% și, respectiv, 89,6% (tabelul 2).

Discuție

În timp ce lumea continuă să lupte împotriva rezistenței antimicrobiene, un diagnostic corect, rapid și precis este necesar pentru arhivarea obiectivului. În Tanzania, bolile cu prezentare febrilă, cum ar fi febra tifoidă, se numără printre bolile care sunt frecvent diagnosticate . Prin urmare, a fost realizat un experiment pentru a evalua acuratețea de diagnosticare a testului Widal și a culturii de scaun efectuate în mod obișnuit, păstrând în același timp hemocultura ca standard de aur.

Prevalența reală a febrei tifoide s-a dovedit a fi de 10,1%, ceea ce înseamnă că pentru fiecare 10 pacienți care sunt testați pozitiv, și doar unul suferea cu adevărat de febră tifoidă. Prevalența raportată în acest studiu a fost, de asemenea, raportată și în alte studii efectuate în Camerun .

Consecințele rezultatelor fals pozitive includ utilizarea greșită a antibioticelor, pericolul probabil de creștere a rezistenței la antibiotice, creșterea costului tratamentului din cauza creșterii șederii în spital a pacienților internați și omiterea unei boli fatale a bolilor febrile.

Sensibilitatea, specificitatea, VPP și VPP a titrării Widal în acest studiu a fost de 81,2% 18,3%, 10,1 și, respectiv, 89,7. Testul Widal a avut o sensibilitate și o valoare predictivă negativă corecte; a avut, de asemenea, o specificitate și o valoare predictivă pozitivă foarte scăzute. Acest lucru s-ar putea datora reacției încrucișate a anticorpilor de la alte enterobacterii . O specificitate scăzută înseamnă că pacienții ar putea suferi de alte cauze de boli, iar o valoare scăzută a VPP înseamnă că majoritatea celor care au fost testați ca fiind bolnavi nu sunt cu adevărat bolnavi de cauza suspectată.

O analiză sistematică a constatat că sensibilitatea, specificitatea, VPP și VPP medii de 73,5 cu SD 12,6 minim de 45,2 și maxim de 98, 75,7 cu SD de 20,2, minim de 13,8 și maxim de 98, 75,2 cu SD 24,8 minim de 31 maxim de 100 și 60 cu SD de 29 minim de 5,7 și maxim de 91, respectiv . Constatările acestui studiu se încadrează în intervalul de revizuire sistematică.

Studii în Tanzania, Mtove în Spitalul Teule Muheza a găsit, sensibilitate, specificitate, NPV și PPV 75%, 98%, 100%, și respectiv 26%. Toate aceste studii concordă cu concluziile revizuirii . Studiul a constatat, cultura de scaun a avut sensibilitate, specificitate, PPV și NPV 31,3, 91,5, 29 și, respectiv, 92,2. Sensibilitatea scăzută poate fi asociată cu timpul de colectare a probelor. Scaunul nu este sensibil în infecția precoce . Sensibilitatea poate fi crescută atunci când proba este prelevată în a 3-a săptămână. În cultura de scaun, creșterea Salmonella nu înseamnă infecție, deoarece metoda poate fi utilizată pentru identificarea purtătorilor. Este pozitivă în 35% din cazuri în infecțiile timpurii .

Revizuirea sistematică , cultura de scaun a avut o sensibilitate, specificitate, VPP și VAN de 71,4%, 66,7, 83 și, respectiv, 50. Aceste constatări se corelează cu cele din studiul actual. Acest lucru se datorează faptului că este predispusă la contaminare care poate duce la un diagnostic greșit.

Comparând testele, scaunul a avut o performanță mai bună în ceea ce privește specificitatea și valoarea predictivă negativă. Cultura de scaun a avut o valoare negativă netă bună de 92,2 și o specificitate de 91,5%, în timp ce testul Widal a avut o specificitate de 18,3 și o valoare negativă netă de 89,7%. Pe de altă parte, Widal a avut performanțe mai bune în ceea ce privește sensibilitatea în comparație cu stoolcultura. Testul Widal a avut o sensibilitate de 81,2, iar stoolcultura are o sensibilitate de 31,3%. Acest lucru înseamnă că testul Widal poate fi util în excluderea cazurilor fără boală, iar scaunul poate fi utilizat în confirmarea cazurilor suspecte.

Statistic, a existat o concordanță corectă (kappa = 0,33) între cultura scaunului și hemocultură, o concordanță slabă (kappa = 0,01) între titrarea Widal și cultura scaunului. Constatări similare au fost observate într-un studiu efectuat de Abebe și colegul său . Constatarea actuală este în dezacord cu un studiu efectuat în Addis Abeba, care a indicat un acord moderat (kappa = 0,41) între testul Widal și hemocultura. Un alt studiu din Etiopia a obținut constatarea, care nu este în dezacord cu acest studiu, acordul dintre testul de aglutinare a tubului Widal (titrare) și cultura fecalelor a fost de 0,33 (kappa = 0,32), în timp ce acest studiu a constatat un acord foarte mic. Acest lucru indică faptul că rezultatul testului Widal în diagnosticul febrei tifoide este mai puțin probabil să fie în acord cu cultura de scaun.

Nakhla et al. au făcut un studiu pentru a găsi testul care poate înlocui testul Widal. A comparat testul de aglutinare cu latex Dri-Dot și testul de flux lateral IgM, cu hemocultura. Sensibilitatea Dri-Dot a fost de 71,4%, iar specificitatea a fost de 86,3% pentru probele recoltate la momentul primului diagnostic. Sensibilitatea și specificitatea fluxului lateral IgM au fost de 80% și, respectiv, 71,4%, deși a crescut sensibilitatea la 84,3%, dar a scăzut specificitatea la 70,5% atunci când ambele teste rapide au fost efectuate în paralel .

Concluzie

Din studiu, testul Widal are o specificitate și o VPP scăzute, dar are o sensibilitate ridicată și o valoare NPV bună cu cultura scaunului. Folosirea unui singur test Widal ca unic test de laborator pentru diagnosticul febrei tifoide va produce un diagnostic greșit. Testul Widal are o concordanță slabă cu hemocultura și cultura scaunului; cultura scaunului are o concordanță bună cu hemocultura. Acest lucru înseamnă că testul Widal nu ar trebui să fie utilizat singur, ci în combinație cu testul hemocultură/stoolocultura.

Valoarea NPV ridicată a însemnat că testul Widal ar putea fi util doar pentru cunoașterea celor care nu sunt bolnavi în populație. Valoarea scăzută a VPP a însemnat că testul Widal ar putea fi util doar pentru a exclude bolile din populație. Cultura de scaun a avut o sensibilitate și o specificitate și o VPP ridicate, cultura de scaun a funcționat mai bine decât testul Widal.

.