A Premix WST-1 sejtproliferációs assay rendszer lehetővé teszi a sejtek proliferációjának és életképességének gyors és egyszerű kolorimetrikus mérését 96 lyukú formátumban, radioaktív izotópok és szerves oldószerek nélkül. A Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System citotoxicitási és gátló vizsgálatokhoz is alkalmazható, ahol a festéktermelés inkább csökken, mint nő.

A kolorimetriás vizsgálat a WST-1 tetrazoliumsónak a mitokondriális szukcinát-tetrazolium reduktáz által az életképes sejtekben történő, formazán osztályú festékké történő hasításán alapul. A sejtek szaporodásával egyre több WST-1 alakul át formazántermékké. A formazán festék mennyisége közvetlen kapcsolatban áll a metabolikusan aktív sejtek számával, és számszerűsíthető a 420-480 nm-en mért abszorbancia mérésével (Amax 450 nm) egy multiwell lemezolvasóban.

Egy erőfeszítés nélküli protokoll

A Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System esetében nincs szükség mosási, betakarítási vagy szolubilizációs lépésekre. A teljes eljárás, a sejtkultúrától az adatelemzésig, elvégezhető egy multiwell lemezolvasóval ugyanabban a 96 lyukú lemezben.

Amint a sejtek tenyésztése megtörtént, a vizsgálat körülbelül 1 óra alatt elvégezhető. Egyszerűen adja hozzá a lemezhez az előkevert WST-1 sejtproliferációs reagenst, tenyéssze sejtjeit legalább 30 percig párásított légkörben (a sejttípustól és sűrűségtől függően akár 4 óráig), majd mérje meg az abszorbanciát. A színezett termék folyamatosan keletkezik, így a lemez ismételt leolvasásával és további fejlesztés céljából a lemez inkubátorba való visszahelyezésével idővel nyomon követheti a kísérlet előrehaladását. Ez kiküszöböli a találgatásokat, és biztosítja, hogy az optimális vizsgálati végpontot ne hagyja figyelmen kívül.

Stabil reagensek

A hagyományos WST-1 vizsgálati reagensekkel ellentétben, amelyek csak három napig tárolhatók 4°C-on vagy egy hónapig -20°C-on, az előkevert WST-1 sejtproliferációs reagenst fokozott stabilitás érdekében alkották meg: két hétig tárolható 4°C-on vagy egy évig -20°C-on. Használatra kész oldatként szállítják, amely WST-1-et és egy elektronkapcsoló reagenst tartalmaz, steril foszfát-pufferelt sóoldatban hígítva.

Nem radioaktív, kolorimetrikus próba

Néhány sejtproliferációs próba a DNS-szintézis során történő radioaktívan jelölt nukleozid felvétel mérésén alapul. Az előkevert WST-1 sejtproliferációs reagensteszt nem radioaktív, ami növeli a kényelmet és a laboratóriumi biztonságot. Továbbá a Premixed WST-1 Cell Proliferation Reagent nagymértékben vízoldható a hasonló vizsgálatokban használt más tetrazolium-sókkal szemben, amelyek oldásához felületaktív anyagokra vagy szerves oldószerekre lehet szükség.

A Premixed WST-1 Cell Proliferation Reagent egyszerűsíti és racionalizálja a sejtproliferációs vizsgálatokat. Az egyszerű, egyoldatos protokoll időt takarít meg és könnyen használható 96 lyukú lemezformátumban. A lemezek leolvashatók és visszatehetők az inkubátorba további fejlesztés céljából, így egyszerűsítve az idősoros kísérleteket.