ORIGINAL PAPER

Biochemical and pharmacological study of venom of the wolf spider Lycosa singoriensis

Liu ZHI; Qian WII; Li JI; Zhang YI; Liang SI

ICollege of Life Sciences, Hunan Normal University, Changsha, Kína
IIAdministrative Center for Basic Research, Ministry of Science ant Technology, Kína

Correspondence to

ABSTRACT

A farkaspók Lycosa singoriensis egy nagyméretű és mérges pók, amely Kína északnyugati részén elterjedt. Más pókmérgekhez hasonlóan a farkaspók mérge is egy kémiai koktél. A Lowry-módszerrel meghatározott fehérjetartalma 0,659 mg fehérje/mg nyers méreg. A MALDI-TOF elemzés kimutatta, hogy a méreg peptidjei rendkívül változatosak, és három csoportra oszthatók, amelyeket három független molekulatartomány jellemez: 2000-2500 Da, 4800-5500 Da és 7000-8000 Da. Ez a molekuláris megoszlás jelentősen eltér a legtöbb eddig vizsgált pókméreg molekulájától. Ez a farkaspókméreg egerekre alacsony neurotoxikus hatással bír, de az emberi eritrociták hemolízisét képes előidézni. Továbbá a méreg antimikrobiális aktivitást mutat prokarióta és eukarióta sejtekkel szemben.

Kulcsszavak: pók, Lycosa singoriensis, nyers méreg, MALDI-TOF, antimikrobiális aktivitás.

BEVEZETÉS

Körülbelül 39 000 leírt pókfaj létezik, és még több vár jellemzésre. Szinte minden pók ragadozó és rendelkezik méregmirigyekkel. A pókmérgek elsődleges javaslata a zsákmány megölése vagy megbénítása. A pókmérgek összetett kémiai koktélok, amelyekben a legtöbb pókméreg fő alkotóelemei a peptidek, kivéve a fekete özvegy pókokéit, amelyek nagy arányban, 100 kD-nál nagyobb fehérjéket tartalmaznak (1-3). A pókmérgek peptidjeit kombinatorikusan állítják elő, ami a becslések szerint összesen mintegy 1,5 millió pókmérgek peptidjét eredményezi. Következésképpen a pókmérgek farmakológiailag és agrokémiailag érdekes új vegyületek gazdag forrását jelentik, amelyek az utóbbi években fokozott figyelmet kaptak a farmakológusok és biokémikusok részéről. Az elmúlt évtizedekben azonban csak néhány pókmérget vizsgáltak kellő részletességgel, ezért eddig a pókmérgek peptidjeinek kevesebb mint 0,01%-át azonosították (4-7).

A Lycosa singoriensis farkaspók Kína északnyugati részén elterjedt nagyméretű pók. A kifejlett nőstény pók testhossza 28-40 mm (35±6 mm), testtömege 2,6-7 g (1. ábra). Ez a szőrös pók föld alatti lyukakban él. Selyemcsővel bélelt üregének átmérője 2-4 cm, hossza 30-60 cm, és az üreg bejáratát gyakran selyemháló borítja. A pók a napot a lyuk alján kuporogva tölti, míg éjszaka a selyemcsövön felmászik, és az odú bejárata közelében rejtőzik el zsákmányra várva. Miután sikeresen elkapja áldozatát, a pók behozza azt az odúba. Sok esetben az odú alján apró rovarok maradványai találhatók. A Lycosa singoriensis farkaspók szintén mérges és agresszív pók. 2000-ben Hszincsiang tartomány északi területéről jelentették, hogy farkaspók embereket és más állatokat harapott meg. A klinikai feljegyzések szerint a pókcsípések többsége nyilvánvaló hatásokat okozott, többek között vörös foltokat és fájdalmat a csípés helye körül (8, 9).

A jelen tanulmányban a Lycosa singoriensis farkaspók mérgének biokémiai és farmakológiai tulajdonságairól számolunk be. Sok más, eddig vizsgált pókméreggel összehasonlítva ez a pókméreg rendelkezik néhány különleges tulajdonsággal, ami hasznos forrássá teszi a gyógyszerhatóanyagok szűréséhez és a pókméreg peptidek biodiverzitásának tanulmányozásához.

MATERIALIS ÉS MÓDSZEREK

Pókok és méreggyűjtés

A felnőtt nőstény Lycosa singoriensis pókokat a kínai Xinjiang tartományban gyűjtöttük, műanyag vödrökben tartottuk, amelyeket műanyag hálóval fedtünk és naponta vizet kaptunk. Az állatok etetésére apróra vágott sertésmájat és férgeket használtak. Sok más nagyméretű pókhoz (10, 7) hasonlóan a Lycosa singoriensis is könnyen agresszívvá válik, ha egy műanyag csődarab provokálja. Szorosan megragadják a csövet, majd méregfogai átszúrják a csövet és mérget fecskendeznek bele. Így elkerülhető az elektromos ingerlés, amely mind a nyálból, mind az emésztőnedvekből származó enzimekkel szennyezheti a mérget. Ezzel a módszerrel körülbelül 300 Lycosa singoriensis pókból körülbelül 50 mg méreg nyerhető, ami lehetővé teszi e pókméreg biokémiai és farmakológiai tulajdonságainak feltárását. A nyers méreg tiszta és színtelen, vízben könnyen oldódó folyadék, amelyet kéthetente gyűjtöttünk. A fagyasztva szárított nyers mérget az elemzés előtt -20°C-on tároltuk.

A nyers méreg SDS-PAGE elemzése

A begyűjtött méreg nátrium-dodecil-szulfát-poliakrilamid gélelektroforézisét (SDS-PAGE) denaturált körülmények között végeztük 10%-os poliakrilamid lemezgélben. Száz mikrogramm liofilizált mérget használtunk az elektroforézishez, és az elválasztott fehérjéket a gélben G250 festéssel tettük láthatóvá.

A nyers méreg MALDI-TOF elemzése

A nyers méreg ujjlenyomatát mátrix-asszisztált lézer deszorpció/ionizációs repülési idő (MALDI-TOF) tömegspektrometria (Voyager-DE STR Biospectometry® munkaállomás, Applied Biosystems, USA) segítségével határoztuk meg. Az ionizálás nitrogénlézerrel (337 nm) történő besugárzással történt 20 kV-os gyorsítófeszültség mellett; mátrixként α-ciano-4-hidroxi-fahéjsavat (CCA) alkalmaztunk.

A nyers méreg hatása izolált ideg-szinapszis preparátumokra

Háromféle izolált ideg-szinapszis preparátumot – egér frenikus ideg-diafragma, patkány vas deferens és varangyszív – használtunk a nyers méreg farmakológiai aktivitásának vizsgálatára. Az egér frenikus ideg-diafragma preparátum-kísérleteket Bülbring (11) szerint végeztük. A vas deferens és varangyszív vizsgálatokat Liang és munkatársai (12) szerint végeztük.

Hemolitikus vizsgálat

A nyers méreg hemolitikus aktivitását heparinizált emberi vörösvértestekkel vizsgáltuk, amelyeket háromszor öblítettünk 5 ml foszfát pufferelt sóoldatban (PBS – 50 mM NaH2PO4 és 150 mM NaCl, pH 7,2), majd 5 percig 3000 rpm-en centrifugáltunk. Ezután a vörösvérsejteket szobahőmérsékleten 1 órán keresztül deionizált vízben (pozitív kontroll), PBS-ben (vak) vagy PBS-ben különböző koncentrációjú (3,1-20 mg/ml) méreganyagokkal inkubáltuk. A mintákat 5 percig 12 000 fordulat/perc fordulatszámon centrifugáltuk. A felülúszót elválasztottuk a pelletről, és az abszorbanciát 570 nm-en mértük.

A nyers méreg antimikrobiális aktivitása

Hat baktérium (Bacillus cereus, Corynebacterium glutamicum, Bacillus subtilis, Micrococcus luteus, Staphylococcus albus és E. coli DH5) és két gombát (Saccaromyces cerevisae és Candida albicans) tenyésztettünk a táptalajban az exponenciális fázis eléréséig, amelynek abszorbanciája 600 nm-en 0,3 és 0,8 között volt. Ötven mikroliter táptalajt egyenletesen szétterítettünk három megszilárdult agarlemezen. A lemezeket 1,5%-os agarózzal/közeggel egészítettük ki, amelyet 100 × 20 mm-es steril Petri-csészékbe öntöttünk. A lemezeket 6 mm átmérőjű szűrőpapírral fedtük le. A szűrőpapírra öt mikroliter normál sóoldatban lévő, különböző koncentrációjú méregoldatot helyeztünk. A 37 °C-on történő egy éjszakán át tartó inkubáció után a nyers méreg hatását a szűrőpapíron lévő baktériumgyepen tiszta körök formájában regisztráltuk.

Ezért ebben a biotesztben a szűrőpapírra különböző koncentrációjú (3 mg/ml, 6 mg/ml és 12 mg/ml) nyers méregoldatokat cseppentettünk, és egy tiszta kör volt kimutatható a papíron, ha a méreg ebben a koncentrációban gátolta a mikrobák növekedését.

EREDMÉNYEK ÉS MEGJEGYZÉSEK

A nyers méreg biokémiai jellemzése

Megállapítottuk, hogy minden milligramm nyers méreg körülbelül 0,659 mg fehérjét/peptideket tartalmaz. Amint a 2. ábrán látható, a nyers méreg nagy molekulatömegű fehérjéi főként a 14 és 31 000 Da közötti molekulatömegek között oszlanak el, egy vastag fehérjesávval 20 000 Da közelében, és egy másik sáv nyilvánvalóan 14 000 Da közelében. Az SDS-PAGE gél paneljének felső részén is látható egy vastag sáv, amely a 10 000 Da alatti molekulatömegű peptidekből áll. A két vastag kötésben eloszló fehérjék/peptidek a nyers méreg legnagyobb mennyiségben előforduló összetevői, amelyek a nyers méreg fehérjekomponensének 80%-ának felelnek meg.

A közelmúltban MALDI-TOF tömegspektrometriát alkalmaztak a méreg peptidek komplexitásának feltárására. Emellett a tömegspektrometria gyors fejlődésével ezt a technológiát széles körben alkalmazták a méregkutatásban (5, 13). Pierre Escoubas és munkatársai (5) például kombinált cDNS és tömegspektrometriai megközelítéssel méregképet festettek az ausztrál tölcsérhálós pókmérgek komplexitásának konceptualizálására. Vizsgálataik azt mutatják, hogy e pókok mérgei sok száz peptidet tartalmaznak, amelyek bimodális eloszlást követnek, a peptidek többsége a 3000-5000 Da tömegtartományban, egy második, kevésbé hangsúlyos csoport pedig a 6500-8500 Da tartományban található. A molekulatömegek ilyen eloszlása analóg azzal, amit korábban számos tarantula-méreg esetében megfigyeltek (4). Hasonló eredményeket találtunk az Ornithoctonus huwena, Ornithoctonus hainana és Chilobrachys jingzhao kínai tarantula pókok mérgének korábbi vizsgálataiban is (14-16).

A 3. ábrán bemutatottak szerint a Lycosa singoriensis nyers méreg MALDI-TOF spektrometriai elemzése azt mutatja, hogy a molekulatömeg-eloszlás analóg módon figyelhető meg az 1000 és 10 000 Da közötti tartományban. A fent említett fajokkal ellentétben azonban a Lycosa singoriensis méreg peptidjei tömegük alapján három csoportra oszthatók. Az első csoportba azok a peptidek tartoznak, amelyek molekulatömege 2000 és 2500 Da között van, ami azt jelzi, hogy körülbelül 20 aminosavmaradványt tartalmaznak. Ezt a molekulatömeg-tartományt az eddig vizsgált pókmérgek többségében ritkán figyelték meg. A második csoportba főként a 4800 és 5500 Da közötti molekulatömegű peptidek tartoznak, ami arra utal, hogy körülbelül 50 aminosavmaradékból állnak. A harmadik csoportot a 7000 és 8000 Da közötti tömegtartományba tartozó peptidek alkotják, ami több mint 60 aminosavmaradványnak felel meg. Becslések szerint az utóbbi két csoportban eloszló peptidek alkotják a méreg peptidjeinek többségét.

Érdekes, hogy meglehetősen kevés peptidnek van 3000 és 5000 Da közötti molekulatömege. Paradox módon ebben a tömegtartományban lévő peptidek sok más pókméregben a legnagyobb mennyiségben előforduló komponensek. További vizsgálatokra lenne szükség ezen ellentmondások tisztázására, ami hozzájárulhat a pókmérgek peptidjeinek evolúciós mechanizmusának megértéséhez. A jelenlegi tanulmány hozzájárul annak bizonyításához, hogy a Lycosa singoriensis peptidjei rendkívül változatosak.

A méregmirigy cDNS-könyvtárak elemzése több mint 200 toxinszerű peptidszekvenciát eredményezett. Ezeknek a cDNS-szekvenciákból származó peptideknek a tömegeloszlása összhangban van a MALDI-TOF spektrometriával megfigyelt tömegeloszlással. A szekvenciák elemzése továbbá kimutatta, hogy az első csoportba tartozó peptidek nem tartalmaznak ciszteinmaradványokat, a második csoportba tartozók 4 vagy 5 diszulfidkötést, míg az utolsó csoportba tartozók több mint 5 diszulfidkötést tartalmaznak (nem publikált adatok). Az eddig azonosított pók peptid toxinok többsége általában 3 vagy 4 diszulfidkötéssel rendelkezik, és 3D szerkezetük a klasszikus inhibitor cisztin-csomó motívumot veszi fel. Következésképpen okkal feltételezhető, hogy a Lycosa singoriensis méreg egyes peptidjei új szerkezeti témával rendelkeznének.

A nyers méreg farmakológiai jellemzése

A nyers méreg nagy dózisban, 200 µg/ml-ben nem tudta blokkolni az egér frenikus ideg rekeszizom preparátumának (n = 5) elektromosan stimulált összehúzódását. Alacsony hatást mutatott a patkány vas deferens rángatózási válaszára is. A 200 µg/ml koncentrációjú nyers méreg csak részben tudta gátolni a rándulási választ 20 percig (n = 5) (4. ábra – A). Ezzel szemben az O. huwena pók nyers mérge ugyanabban a koncentrációban képes volt gyorsan blokkolni ugyanannak az ideg-diafragma preparátumnak vagy patkány vas deferensnek a rángatózási válaszát (az adatok nem láthatóak). A Lycosa singoriensis nyers mérge azonban jelentős hatást gyakorolt a varangyszív összehúzódására. A 100 µg/ml nyers méreg jelenlétében a szívverés sebessége és nagysága erőteljesen fokozódott (n = 5) (4. ábra – B). Ez arra utal, hogy a nyers méreg tartalmaz néhány kardiotonikus hatású vegyületet.

A kardiotonikus szereket jelenleg három osztályba sorolják szubcelluláris hatásmechanizmusuk alapján, nevezetesen a upstream mechanizmusokon (Ca2+-mobilizátorok), valamint a központi és downstream mechanizmusokon (Ca2+-szenzibilizátorok) keresztül ható szerek. Ezek a szerek az intracelluláris Ca2+ ionkoncentráció emelésével pozitív inotróp hatást váltanak ki (17). A mai napig nem számoltak be a farkaspókmérgek kardiotonikus hatásáról, miközben ezekből a mérgekből még nem tisztítottak és jellemeztek kardiotonikus vegyületeket. Ezért fontos a Lycosa singoriensis méregből származó kardiotonikus vegyületek vizsgálata.

A nyers méreg hemolitikus aktivitását friss humán eritrociták felhasználásával határoztuk meg. Amint az 5. ábra (A) mutatja, a nyers méreg dózisfüggő módon bomlasztotta a humán eritrocitákat. Az 50%-os gátlás hatékony koncentrációjának (EC50) értéke 1,25 mg/ml.

Amint arról Budnik és munkatársai (18) beszámoltak, a Lycosa singoriensis nyers méreg antimikrobiális peptideket tartalmaz (lycocitin 1, 2 és 3 néven), amelyek mikromoláris koncentrációban képesek gátolni a gram-pozitív és gram-negatív baktériumok és gombák növekedését. Ezért a nyers méreg antimikrobiális aktivitását prokarióta és eukarióta sejtekkel szemben egyaránt teszteltük a lemezes növekedésgátlási próbával. Biotesztünk körülményei között a nyers méregre legérzékenyebb sejttörzsek a Bacillus subtilis és a Staphylococcus sp voltak, amelyekben a növekedés 3 mg/ml-nél erősen gátolt volt. A méreg erősen hatott a Corynebacterium glutamicum és a Micrococcus luteus ellen is, de gyengén az egyik gombatörzs (Candida albicans) ellen. A nyers méregnek azonban nem volt kimutatható hatása az E. colira és a Saccaromyces cerevisae-re még a magas, 12 mg/ml-es koncentrációban sem (5. ábra – B).

Az elmúlt tíz évben számos antimikrobiális peptidet azonosítottak pókmérgekből. A Lycosa carolinensis farkaspók mérgéből azonosították az I. és II. likotoxint. Mindkettő lineáris antimikrobiális peptid, amelyek a pórusképző peptidekre jellemző amfipatikus α-hélix jelleget mutatják. Pórusképző mechanizmusukat az is igazolta, hogy elősegítik a kalciumionok kiáramlását a szinaptoszómákból (19). A likotoxinok után a Cupiennus salei és az Oxyopes kitabensis farkaspók mérgéből származó cupienninek (20-22) és oxyopininek (23, 24) is antimikrobiális hatásúnak bizonyultak. Nemrégiben a Lachesana tarabaevi pók mérgéből hét új, rövid lineáris antimikrobiális és citolitikus peptidet, a latarcinokat tisztították. Ezenkívül öt új peptidet, amelyek jelentős szerkezeti hasonlóságot mutatnak a tisztított latarcinokkal, a pók méregmirigyének expresszált szekvencia tag adatbázisából jósoltak meg (25).

A pókmérgekből származó peptidek a lineáris kationos α-hélix antimikrobiális peptidek közé tartoznak. Az antimikrobiális peptidek ezen osztályának van néhány közös jellemzője, mint például a mikrobiális növekedés gátlása alacsony mikromoláris koncentrációban és amfipatikus és kationos helikális képződmény kialakítása hidrofób környezetben. Az elmúlt évtizedekben számos antimikrobiális peptidet, köztük lineáris kationos α-hélix antimikrobiális peptideket fedeztek fel állatokban és növényekben egyaránt. Ezek a peptidek jellemzően 12-45 aminosavból állnak, és fontos szerepet játszanak a legtöbb élő szervezet veleszületett immunrendszerében (26-28). Legtöbbjük a következő négy tulajdonsággal képes elpusztítani a mikroorganizmusokat: szelektív toxicitás, gyors pusztítás, széles antimikrobiális spektrum, és nem alakul ki rezisztencia (29-31).

Összefoglalva, új biokémiai és farmakológiai eredményekről számolunk be a Lycosa singoriensis farkaspók mérgéről. E méreg peptidjeinek különleges tulajdonságai ideális modellé teszik a pókméreg peptidek evolúciós mechanizmusainak tanulmányozására. Ennek a méregnek a farmakológiai vizsgálata segít a bioaktív peptidek tisztításában és jellemzésében a további vizsgálatok során.

HÁTTÉRI KÖNYVEK

Ezt a munkát a Nemzeti Tudományos Alapítvány projektjei (30430170 és 30700127) támogatták.

1. Corzo G, Escoubas P. Farmakológiailag aktív pók peptid toxinok. Cell Mol Life Sci. 2003;60(11):2409-26.

2. Escoubas P. Molecular diversification in spider venoms: a web of combinatorial peptide libraries. Mol Divers. 2006;10(4):545-54.

3. King GF. A pókok csodálatos világa: előszó a Toxicon pókmérgekről szóló különszámához. Toxicon. 2004;43(5):471-5.

4. Escoubas P, Rash L. Tarantulák: nyolclábú gyógyszerészek és kombinatorikus kémikusok. Toxicon. 2004;43(5):555-74.

5. Escoubas P, Sollod B, King GF. Venom landscapes: a pókmérgek komplexitásának feltárása kombinált cDNS és tömegspektrometriai megközelítéssel. Toxicon. 2006;47(6):650-63.

6. Sollod BL, Wilson D, Zhaxybayeva O, Gogarten JP, Drinkwater R, King GF. A pókfélék voltak az elsők, akik kombinatorikus peptidkönyvtárakat használtak? Peptides. 2005;26(1):131-9.

7. Tedford HW, Sollod BL, Maggio F, King GF. Ausztrál tölcsérhálós pókok: mesteri rovarölő vegyészek. Toxicon. 2004;43(5):601-18.

8. Lu DL, Zhang DF. Kétféle mérges pók Xinjiangban és a pókcsípés megelőzése és gyógyítása. Chin J Zool. 2001;36(5):40-2.

8. Kezdeti megfigyelések a Lycosa singorensis életmódjáról. Chin J Zool. 2004;39:63-7.

10. Liu Z, Dai J, Dai L, Deng M, Hu Z, Hu W, Liang S. Az Ornithoctonus huwena kínai madárpókból származó huwentoxin-X, az N-típusú kalciumcsatornák specifikus blokkolójának funkciója és oldatszerkezete. J Biol Chem. 2006;281(13):8628-35.

11. Bulbring E. Megfigyelések a patkány izolált frenikus idegi rekeszizom preparátumáról. Br J Pharmacol Chemother. 1946;1(1):38-61.

12. Liang SP, Chen XD, Shu Q, Zhang Y, Peng K. A kínai madárpók Selenocosmia huwena mérgéből származó huwentoxin-I neurotoxin preszinaptikus aktivitása. Toxicon. 2000;38(9):1237-46.

13. Guette C, Legros C, Tournois G,Goyffon M, Célérier ML. A Lasiodora parahybana tarantula méregmirigyének peptidprofilja mátrix-asszisztált lézer deszorpciós/ionizációs time-of-flight tömegspektrometriával. Toxicon. 2006;47(6):640-9.

14. Liang S. A kínai madárpók Selenocosmia huwena Wang mérgéből származó peptid toxinok áttekintése . Toxicon. 2004;43(5):575-85.

15. Liao Z, Cao J, Li S, Yan X, Hu W, He Q, Chen J, Tang J, Xie J, Liang S. A kínai tarantula Chilobrachys jingzhao mérgének proteomikai és peptidomikai elemzése. Proteomics. 2007;7(11):1892-907.

16. Yuan C, Jin Q, Tang X, Hu W, Cao R, Yang S, Xiong J, Xie C, Xie J, Liang S. A kínai madárpók, Ornithoctonus huwena Wang mérgének proteomikai és peptidomikai jellemzése. J Proteome Res. 2007;6(7):2792-801.

17. Endoh M. Egy Na+ csatorna agonista: potenciális kardiotonikus szer új mechanizmussal? Br J Pharmacol. 2004;143(6):663-5.

18. Budnik BA, Olsen JV, Egorov TA, Anisimova VE, Galkina TG, Musolyamov AK, Grishin EV, Zubarev RA. A Lycosa singoriensis farkaspók méregmirigyéből izolált antimikrobiális peptidek de novo szekvenálása. J Mass Spectrom. 2004;39(2):193-201.

19. Yan L, Adams ME. Lycotoxinok, antimikrobiális peptidek a Lycosa carolinensis farkaspók mérgéből. J Biol Chem. 1998;273(4):2059-66.

20. Kuhn-Nentwig L, Dathe M, Walz A, Schaller J, Nentwig W. Cupiennin 1d: a citolitikus aktivitás a hidrofób N-terminustól függ és a poláris C-terminus modulálja. FEBS Lett. 2002;527(1-3):193-8.

21. Kuhn-Nentwig L, Muller J, Schaller J, Walz A, Dathe M, Nentwig W. Cupiennin 1, a Cupiennius salei pók (Ctenidae) mérgének új, erősen bázikus antimikrobiális peptidcsaládja. J Biol Chem. 2002;277(13):11208-16.

22. Pukala TL, Doyle JR, Llewellyn LE, Kuhn-Nentwig L, Apponyi MA, Separovic F, Bowie JH. A cupiennin 1a, a Cupiennius salei neotrópusi vándorpók mérgéből származó antimikrobiális peptid, a neuronális nitrogén-oxid-szintáz nitrogén-oxid képződését is gátolja. FEBS J. 2007;274(7):1778-84.

23. Corzo G, Villegas E, Gomez-Lagunas F, Possani LD, Belokoneva OS, Nakajima T. Oxyopinins, large amphipathic peptides isolated from the venom of the wolf spider Oxyopes kitabensis with cytolytic properties and positive insecticidal cooperativity with spider neurotoxins. J Biol Chem. 2002;277(26):23627-37.

24. Nomura K, Corzo G. Pókból származó antimikrobiális peptidek, oxyopininek lipidmembránokhoz való kötődésének hatása. Biochim Biophys Acta. 2006;1758(9):1475-82.

25. Kozlov SA, Vassilevski AA, Feofanov AV, Surovoy AY, Karpunin DV, Grishin EV. Latarcinok, antimikrobiális és citolitikus peptidek a Lachesana tarabaevi pók (Zodariidae) mérgéből, amelyek a biomolekuláris diverzitást példázzák. J Biol Chem. 2006;281(30):20983-92.

26. Brogden KA. Antimikrobiális peptidek: pórusképzők vagy metabolikus gátlók baktériumokban? Nat Rev Microbiol. 2005;3(3):238-50.

27. Brown KL, Hancock RE. Kationos gazdavédelmi (antimikrobiális) peptidek. Curr Opin Immunol. 2006;18(1):24-30.

28. Zasloff M. A többsejtű szervezetek antimikrobiális peptidjei. Nature. 2002;415(6870):389-95.

29. Matsuzaki K. Miért és hogyan hasznosulnak a peptid-lipid kölcsönhatások az önvédelemben? Magaininok és tachyplesinek mint archetípusok. Biochim Biophys Acta. 1999;1462(1-2):1-10.

30. Mcphee JB, Hancock RE. A gazdaszervezet védelmi peptidjeinek funkciója és terápiás lehetőségei. J Pept Sci. 2005;11(11):677-87.

31. Mookherjee N, Hancock RE. Kationos gazdavédelmi peptidek: veleszületett immunrendszert szabályozó peptidek mint a fertőzések kezelésének új megközelítése. Cell Mol Life Sci. 2007;64(7-8):922-33.

Correspondence to:
Songpiing Liang
College of Life Sciences, Hunan Normal University
Changsha, Hunan, 410081, Kína.
Telefon: +86 731 8872556. Fax: +86 731 8861304.
Email: [email protected].