Xenodiagnostika
Vyhodnocení pacienta, diagnostika a diferenciální diagnostika
Pro správnou diagnózu je třeba zjistit, zda byl pacient vystaven T. cruzi v důsledku cestování do endemické oblasti nebo krevní transfuze. Vhodný výběr testů umožňuje ve většině případů definitivní parazitologickou diagnózu.
V akutním stadiu je hlavním postupem přímé mikroskopické vyšetření antikoagulované čerstvé krve nebo preparátu buffy coat na přítomnost pohyblivých trypanosom. Parazity je třeba potvrdit v barveném preparátu, jako jsou husté krevní filmy, buffy coat a sediment po odstředění supernatantu sražené krve. Krev lze také kultivovat na médiu Nicolle-Novy-McNeal (NNM) a naočkovat laboratorním myším nebo potkanům. Ke kultivačnímu nebo histologickému vyšetření přicházejí v úvahu také biopsie lymfatických uzlin nebo kosterního svalstva. V chronickém stadiu lze parazita zjistit pouze kultivací nebo xenodiagnostikou.18,22
Xenodiagnostika je postup, při kterém se k detekci infekce T. cruzi u lidí používá vektor, který funguje jako biologické kultivační médium. Laboratorně neinfikované nymfy triatomy se umístí do válcovité nádoby, přikryjí se kouskem gázy a přiloží se na povrch kůže (horní končetiny), podepřené náramkem. Tyto triatominy, které byly v předchozích 3 až 4 týdnech nekrmené, zůstanou na povrchu kůže asi 30 minut, zakuklí se a poté se uchovávají v entomologických laboratorních podmínkách. Asi po 30 dnech se exkrety hmyzu mikroskopicky vyšetří na přítomnost pohyblivých trypomastigotů T. cruzi. Xenodiagnostika se ukázala jako užitečná pro hodnocení parazitémie a jejího vztahu ke klinickým stavům Chagasovy choroby. Je také považována za účinnou diagnostickou metodu T. cruzi v krevním řečišti a je zvláště užitečná u chronické chagasovy infekce.38
Serologické vyšetření není pro diagnostiku akutního onemocnění obecně nutné. Protilátky třídy IgM jsou obvykle zvýšeny na počátku akutní fáze, ale s postupujícím onemocněním jsou nahrazeny protilátkami třídy IgG. Falešně pozitivní reakce se mohou objevit v přítomnosti leishmaniózy nebo T. rangeli (nepatogenní parazit vyskytující se u lidí ve Střední Americe). Další laboratorní testy mohou ukázat lymfocytární leukocytózu, zvýšenou rychlost sedimentace nebo přechodné elektrokardiografické abnormality. V některých oblastech Jižní Ameriky může radiologické vyšetření prokázat zvětšení srdce s charakteristickými apikálními aneuryzmaty, megaesofagus nebo megakolon.
Diagnostika chronické Chagasovy choroby je obtížná, protože závisí na klinickém posouzení při vyloučení jiných příčin srdečního nebo gastrointestinálního onemocnění a také na průkazu protilátek proti T. cruzi. Xenodiagnostika je velmi užitečná, ale k potvrzení infekce je nutné srovnání různých sérologických testů, protože parazitémie v tomto stadiu je charakteristicky nízká. Hlavními sérologickými testy na infekci T. cruzi jsou nepřímá hemaglutinace, nepřímá imunofluorescence, imunoenzymatické testy (ELISA), přímá aglutinace s 2-merkaptoetanolem (DA-2ME) a fixace komplementu (Guerreiro-Machado reakce). Pozitivní reakce alespoň ve dvou z uvedených testů umožňuje lékaři potvrdit chagasovou etiologii.39
V poslední době se v chronickém stadiu k detekci parazita ve vzorcích krve používá PCR. Další slibnou technikou pro budoucí diagnostiku Chagasovy choroby je Western blot.21,39
Akutní Chagasovu chorobu je třeba odlišit od jiných systémových infekcí, jako je břišní tyfus, viscerální leishmanióza, schistosomóza, mononukleóza, toxoplazmóza a horečka dengue. Romañův příznak je třeba odlišit od jiných příčin jednostranného edému očnice, jako je reakce na kousnutí hmyzem, trauma nebo orbitální celulitida. Vrozené infekce T. cruzi jsou velmi podobné vrozené toxoplazmóze, cytomegalické inkluzní chorobě a syfilis. Chagasova myokardiopatie se podobá poporodní, alkoholické a fibrotické myokardiopatii. Chagasovu meningoencefalitidu lze odlišit od toxoplazmózy díky velkému množství parazitů v mozkomíšním moku. Hodnota pozitivních sérologických nálezů na T. cruzi v diferenciální diagnóze srdečních i megaplazmatických onemocnění bude záviset na prevalenci protilátek v celkové populaci.