Systém pro testování proliferace buněk Premix WST-1 umožňuje rychlé a snadné kolorimetrické měření proliferace a životaschopnosti buněk ve formátu 96 jamek bez radioaktivních izotopů nebo organických rozpouštědel. Systém Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System je rovněž použitelný pro testy cytotoxicity a inhibice, kde se produkce barviva spíše snižuje než zvyšuje.

Kolorimetrický test je založen na štěpení tetrazoliové soli WST-1 na barvivo formazanové třídy mitochondriální sukcinát-tetrazoliumreduktázou v životaschopných buňkách. Jak se buňky množí, více WST-1 se přeměňuje na formazanový produkt. Množství formazanového barviva přímo souvisí s počtem metabolicky aktivních buněk a lze jej kvantifikovat měřením absorbance při 420-480 nm (Amax 450 nm) ve vícejamkové destičkové čtečce.

Protokol bez námahy

Systém Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System nevyžaduje žádné promývání, sklízení ani rozpouštění. Celý postup, od kultivace buněk až po analýzu dat, lze provést pomocí vícejamkové destičkové čtečky ve stejné 96jamkové destičce.

Po kultivaci buněk lze test dokončit přibližně za 1 hodinu. Stačí přidat na destičku předmíchané činidlo pro buněčnou proliferaci WST-1, kultivovat buňky po dobu nejméně 30 min ve zvlhčeném prostředí (až 4 h, v závislosti na typu a hustotě buněk) a změřit absorbanci. Barevný produkt se vytváří kontinuálně, takže můžete sledovat průběh svého experimentu v čase opakovaným odečítáním a vracením destičky do inkubátoru k dalšímu vývoji. Tím se eliminují dohady a zajistí se, že optimální koncový bod testu nebude přehlédnut.

Stabilní činidla

Na rozdíl od tradičních testovacích činidel WST-1, která lze skladovat pouze tři dny při 4 °C nebo jeden měsíc při -20 °C, bylo složení Premixed WST-1 Cell Proliferation Reagent vytvořeno s ohledem na vyšší stabilitu: lze jej skladovat dva týdny při 4 °C nebo jeden rok při -20 °C. Dodává se jako roztok připravený k použití obsahující WST-1 a činidlo pro elektronovou vazbu, zředěný ve sterilním fosfátovém pufrovaném roztoku.

Neradioaktivní, kolorimetrický test

Mnoho testů buněčné proliferace je založeno na měření vychytávání radioaktivně značených nukleosidů během syntézy DNA. Test Premixed WST-1 Cell Proliferation Reagent je neradioaktivní, což zvyšuje pohodlí a bezpečnost laboratoře. Kromě toho je přípravek Premixed WST-1 Cell Proliferation Reagent vysoce rozpustný ve vodě ve srovnání s jinými tetrazoliovými solemi používanými v podobných testech, které mohou pro rozpuštění vyžadovat povrchově aktivní látky nebo organická rozpouštědla.

Přípravek Premixed WST-1 Cell Proliferation Reagent zjednoduší a zefektivní vaše testy buněčné proliferace. Jednoduchý protokol s jedním roztokem šetří čas a snadno se používá ve formátu 96jamkových destiček. Destičky lze odečíst a vrátit do inkubátoru k dalšímu vývoji, což zjednodušuje experimenty s časovým průběhem.