ORIGINAL PAPER

Studiul biochimic și farmacologic al veninului păianjenului lup Lycosa singoriensis

Liu ZHI; Qian WII; Li JI; Zhang YI; Liang SI

ICollege of Life Sciences, Hunan Normal University, Changsha, China
IIAdministrative Center for Basic Research, Ministry of Science and Technology, China

Correspondență pentru

ABSTRACT

Păianjenul lup Lycosa singoriensis este un păianjen mare și veninos distribuit în nord-vestul Chinei. Ca și alte veninuri de păianjen, veninul păianjenului lup este un cocktail chimic. Conținutul său de proteine este de 0,659 mg de proteine/mg de venin brut, determinat prin metoda Lowry. Analiza MALDI-TOF a arătat că peptidele veninului sunt foarte diverse și pot fi împărțite în trei grupuri caracterizate de trei intervale moleculare independente: 2.000 – 2.500 Da, 4.800 – 5.500 Da și, respectiv, 7.000 – 8.000 Da. Această distribuție moleculară diferă substanțial de cele ale majorității veninurilor de păianjen studiate până în prezent. Acest venin de păianjen lup are o acțiune neurotoxică scăzută asupra șoarecilor, dar poate induce hemoliza eritrocitelor umane. Mai mult, veninul prezintă activitate antimicrobiană împotriva celulelor procariote și eucariote.

Cuvinte cheie: păianjen, Lycosa singoriensis, venin brut, MALDI-TOF, activitate antimicrobiană.

INTRODUCERE

Există aproximativ 39.000 de specii de păianjeni descrise, cu un număr și mai mare care așteaptă să fie caracterizate. Aproape toți păianjenii sunt prădători și au glande veninoase. Propunerea principală a veninurilor de păianjen este de a ucide sau paraliza prada. Veninurile de păianjen sunt cocktailuri chimice complexe în care peptidele sunt principalii constituenți ai majorității veninurilor de păianjen, cu excepția celor ale păianjenului văduva neagră care conțin o proporție mare, mai mare de 100 kD proteine (1-3). Peptidele din veninul de păianjen sunt produse într-un mod combinatoriu, ceea ce duce la un total estimat de aproximativ 1,5 milioane de peptide de venin de păianjen. În consecință, veninul de păianjen este o sursă bogată de compuși noi, interesanți din punct de vedere farmacologic și agrochimic, care au primit o atenție sporită din partea farmacologilor și biochimiștilor în ultimii ani. Cu toate acestea, în ultimele decenii, doar câteva veninuri de păianjen au fost studiate suficient de detaliat și, prin urmare, mai puțin de 0,01% din peptidele veninului de păianjen au fost identificate până în prezent (4-7).

Păianjenul lup Lycosa singoriensis este un păianjen mare distribuit în nord-vestul Chinei. Femela adultă a păianjenului are o lungime a corpului cuprinsă între 28 și 40 mm (35±6 mm) și o greutate corporală cuprinsă între 2,6 și 7 g (figura 1). Acest păianjen păros trăiește în găuri subterane. Vizuina sa, căptușită cu un tub de mătase, are un diametru de la 2 la 4 cm și o lungime de la 30 la 60 cm, iar intrarea în vizuină este adesea acoperită cu o plasă de mătase. Păianjenul își petrece ziua ghemuit pe fundul găurii, în timp ce urcă pe tubul de mătase și se ascunde lângă intrarea în vizuină, așteptând prada pe timp de noapte. După ce reușește să prindă victimele, păianjenul le aduce în gaură. În multe cazuri, pe fundul vizuinii se găsesc reziduuri de insecte mici. Păianjenul lup Lycosa singoriensis este, de asemenea, un păianjen veninos și agresiv. În 2000, s-a raportat că au existat mușcături de păianjen lup la oameni și alte animale în zona de nord a provinciei Xinjiang. Conform înregistrărilor clinice, majoritatea mușcăturilor de păianjen au provocat efecte aparente, inclusiv semne roșii și durere în jurul locurilor de mușcătură (8, 9).

În acest studiu, raportăm proprietățile biochimice și farmacologice ale veninului păianjenului lup Lycosa singoriensis. În comparație cu multe alte veninuri de păianjen studiate până în prezent, acest venin de păianjen are unele proprietăți distincte, ceea ce îl face o sursă utilă pentru depistarea unor piste de medicamente și pentru studierea biodiversității peptidelor veninului de păianjen.

MATERIALE ȘI METODE

Păianjeni și colectarea veninului

Femele adulte de păianjen Lycosa singoriensis au fost colectate în provincia Xinjiang, China, menținute în găleți de plastic care au fost acoperite cu plase de plastic și cărora li s-a dat apă zilnic. Pentru hrana animalelor s-au folosit ficat de porc tocat și viermi. La fel ca mulți alți păianjeni mari (10, 7), Lycosa singoriensis devin ușor agresivi atunci când sunt provocați de o bucată de tub de plastic. Ei apucă strâns tubul, iar apoi colții săi veninoși străpung tubul și injectează venin în interior. Astfel se evită necesitatea stimulării electrice, care poate contamina veninul cu enzime atât din salivă, cât și din fluidele digestive. Utilizarea acestei metode ar putea produce aproximativ 50 mg de venin de la aproximativ 300 de păianjeni Lycosa singoriensis, permițând astfel explorarea proprietăților biochimice și farmacologice ale veninului acestui păianjen. Veninul brut este un lichid limpede și incolor, ușor solubil în apă și a fost colectat la fiecare două săptămâni. Veninul brut liofilizat a fost depozitat la -20°C înainte de analiză.

Analiză SDS-PAGE a veninului brut

Electroforeza în gel de poliacrilamidă cu dodecil sulfat de sodiu (SDS-PAGE) a veninului colectat a fost efectuată în condiții denaturate într-un gel de poliacrilamidă în plăci de 10%. O sută de micrograme de venin liofilizat au fost utilizate pentru electroforeză, iar proteinele separate în gel au fost vizualizate prin colorarea cu G250.

Analiza MALDI-TOF a veninului brut

Amprenta digitală a veninului brut a fost determinată cu ajutorul unei spectrometrii de masă MALDI-TOF (matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight) (Voyager-DE STR Biospectometry® workstation, Applied Biosystems, SUA). Ionizarea a fost realizată prin iradiere cu un laser cu azot (337 nm) la o tensiune de accelerare de 20 kV; ca matrice a fost utilizat acidul α-ciano-4-hidroxi-cinamic (CCA).

Efectul veninului brut asupra preparatelor de sinapse nervoase izolate

Trei tipuri de preparate de sinapse nervoase izolate – nervul frenic de șoarece-diafragmă, vas deferens de șobolan și inimă de broască – au fost folosite pentru a investiga activitatea farmacologică a veninului brut. Experimentele de preparare a nervului frenic de șoarece-diafragmă au fost efectuate în conformitate cu Bülbring (11). Testele asupra vaselor deferente și a inimii de broască au fost efectuate în conformitate cu Liang et al. (12).

Testul hemolitic

Activitatea hemolitică a veninului brut a fost testată cu globule roșii umane heparinizate clătite de trei ori în 5 ml de soluție salină tamponată cu fosfat (PBS – 50 mM NaH2PO4 și 150 mM NaCl, pH 7,2) și centrifugate timp de 5 minute la 3.000 rpm. Globulele roșii au fost apoi incubate la temperatura camerei timp de 1 oră în apă deionizată (control pozitiv), în PBS (martor) sau cu venin la diferite concentrații (de la 3,1 la 20 mg/mL) în PBS. Probele au fost centrifugate la 12.000 rpm timp de 5 minute. Supernatantul a fost separat de pelete, iar absorbanța acestuia a fost măsurată la 570 nm.

Activitatea antimicrobiană a veninului brut

Șase bacterii (Bacillus cereus, Corynebacterium glutamicum, Bacillus subtilis, Micrococcus luteus, Staphylococcus albus și E. coli DH5) și, respectiv, două ciuperci (Saccaromyces cerevisae și Candida albicans) au fost cultivate în mediul de cultură până la atingerea fazei exponențiale cu o absorbanță la 600 nm cuprinsă între 0,3 și 0,8. Cincizeci de microlitri de mediu au fost împrăștiați uniform pe trei plăci de agar solidificat. Plăcile au fost completate cu agaroză/mediu de 1,5 % turnat în plăci Petri sterile de 100 × 20 mm. O hârtie de filtru cu diametrul de 6 mm a acoperit plăcile. Cinci microlitri de soluție de venin, în soluție salină normală, la diferite concentrații, au fost plasați pe hârtia de filtru. După incubare la 37°C peste noapte, efectele veninului brut au fost înregistrate sub forma unor cercuri clare în gazonul bacterian de pe hârtia de filtru.

Prin urmare, în acest biotest, soluțiile de venin brut la diferite concentrații (3 mg/mL, 6 mg/mL și 12 mg/mL) au fost lăsate să cadă pe hârtia de filtru, iar un cerc clar a fost detectabil pe hârtie dacă veninul la această concentrație a inhibat creșterea microbiană.

REZULTATE ȘI DISCUȚII

Caracterizarea biochimică a veninului brut

S-a constatat că fiecare miligram de venin brut conține aproximativ 0,659 mg de proteine/peptide. După cum se afișează în figura 2, proteinele cu masă moleculară mare din veninul brut sunt distribuite în principal între masele moleculare cuprinse între 14 și 31.000 Da, cu o bandă proteică groasă lângă 20.000 Da și o altă bandă evidentă lângă 14.000 Da. O bandă groasă este, de asemenea, vizibilă în partea superioară a panoului gelului SDS-PAGE, care constă în peptide cu mase moleculare mai mici de 10.000 Da. Proteinele/peptidele distribuite în cele două legături groase sunt cele mai abundente componente ale veninului brut, care corespund la 80% din componenta proteică a veninului brut.

Recent, spectrometria de masă MALDI-TOF a fost aplicată pentru a elucida complexitatea peptidelor veninului. În plus, odată cu dezvoltarea rapidă a spectrometriei de masă, această tehnologie a fost utilizată pe scară largă în cercetarea veninului (5, 13). De exemplu, Pierre Escoubas et al. (5) au realizat un tablou al veninului pentru a conceptualiza complexitatea veninurilor păianjenului cu pânză de pâslă australian prin utilizarea unei abordări combinate de ADNc și spectrometrie de masă. Studiile lor demonstrează că veninul acestor păianjeni conține mai multe sute de peptide care urmează o distribuție bimodală, cu majoritatea peptidelor în intervalul de masă 3.000-5.000 Da și un al doilea grup mai puțin pronunțat în intervalul 6.500-8.500 Da. Această distribuție a maselor moleculare este analogă cu cea observată anterior pentru un număr mare de veninuri de tarantule (4). Rezultate similare au fost, de asemenea, constatate în studiile noastre anterioare asupra veninurilor de la păianjenii tarantule chinezești Ornithoctonus huwena, Ornithoctonus hainana și Chilobrachys jingzhao (14-16).

Așa cum este prezentat în figura 3, analiza spectrometrică MALDI-TOF a veninului brut de Lycosa singoriensis demonstrează că distribuția maselor moleculare este observată în mod analog în intervalul de la 1.000 la 10.000 Da. Cu toate acestea, spre deosebire de speciile menționate mai sus, peptidele veninului de Lycosa singoriensis pot fi împărțite în trei grupe în funcție de masele lor. Primul grup cuprinde peptide care posedă mase moleculare cuprinse între 2.000 și 2.500 Da, ceea ce indică faptul că acestea au aproximativ 20 de reziduuri de aminoacizi. Acest interval de masă moleculară a fost rar observat în majoritatea veninurilor de păianjen studiate până în prezent. Al doilea grup include în principal peptide cu mase moleculare în intervalul 4.800-5.500 Da, ceea ce sugerează că acestea sunt compuse din aproximativ 50 de reziduuri de aminoacizi. Al treilea grup este format din peptide cu mase cuprinse între 7.000 și 8.000 Da, ceea ce corespunde la mai mult de 60 de reziduuri de aminoacizi. Se estimează că peptidele distribuite în ultimele două grupe reprezintă majoritatea peptidelor veninului.

Interesant este faptul că destul de puține peptide au mase moleculare între 3.000 și 5.000 Da. Paradoxal, peptidele din acest interval de masă sunt cele mai abundente componente în multe alte veninuri de păianjen. Ar fi necesare studii suplimentare pentru a elucida aceste discrepanțe, care ar putea contribui la înțelegerea mecanismului evolutiv al peptidelor din veninul de păianjen. Studiul actual contribuie la dovedirea faptului că peptidele Lycosa singoriensis sunt foarte diverse.

Analiza bibliotecilor de ADNc din glanda veninoasă a dat peste 200 de secvențe de peptide asemănătoare toxinelor. Distribuția de masă a acestor peptide derivate din secvențele ADNc este în concordanță cu cea observată prin spectrometrie MALDI-TOF. În plus, analiza secvențelor a arătat că peptidele din primul grup nu au reziduuri de cisteină, iar cele din al doilea grup conțin 4 sau 5 legături disulfidice, în timp ce cele din ultimul grup au mai mult de 5 legături disulfidice (date nepublicate). Majoritatea toxinelor peptidice de păianjen identificate până în prezent au, de obicei, 3 sau 4 legături disulfidice, iar structurile lor 3D adoptă motivul clasic de inhibitor cu nod de cistină. În consecință, există motive să credem că unele peptide din veninul de Lycosa singoriensis ar poseda o temă structurală nouă.

Caracterizarea farmacologică a veninului brut

Veninul brut, la o doză mare de 200 µg/mL, nu a putut bloca contracția stimulată electric a preparatului de diafragmă a nervului frenic de șoarece (n = 5). De asemenea, a prezentat un efect scăzut asupra răspunsului de contracție al vaselor deferente de șobolan. Concentrația de 200 µg/mL de venin brut a putut inhiba doar parțial răspunsul de contracție timp de 20 de minute (n = 5) (Figura 4 – A). În schimb, veninul brut al păianjenului O. huwena, la aceeași concentrație, a fost capabil să blocheze rapid răspunsul de contracție al aceluiași preparat de nerv-diafragmă sau al vaselor deferente de șobolan (datele nu sunt prezentate). Cu toate acestea, veninul brut de Lycosa singoriensis a avut un efect semnificativ asupra contracției inimii broaștei. În prezența a 100 µg/mL de venin brut, ritmul și amploarea bătăilor inimii au fost puternic crescute (n = 5) (figura 4 – B). Acest lucru sugerează că veninul brut conține unii compuși care sunt cardiotonici.

În prezent, agenții cardiotonici sunt clasificați în trei clase pe baza mecanismelor lor de acțiune subcelulare, și anume, agenți care acționează prin mecanisme în amonte (mobilizatori de Ca2+), precum și prin mecanisme centrale și în aval (sensibilizatori de Ca2+). Acești agenți induc un efect inotropic pozitiv prin creșterea concentrației intracelulare de ioni Ca2+ (17). Până în prezent, nu există niciun raport privind un efect cardiotonic al veninurilor de păianjen lup, în timp ce niciun compus cardiotonic nu a fost încă purificat și caracterizat din aceste veninuri. Prin urmare, este important să se investigheze compușii cardiotonici din veninul Lycosa singoriensis.

Activitatea hemolitică a veninului brut a fost determinată prin utilizarea de eritrocite umane proaspete. După cum se arată în figura 5 (A), veninul brut a perturbat eritrocitele umane într-o manieră dependentă de doză. Valoarea concentrației sale efective de inhibiție de 50% (EC50) este de 1,25 mg/mL.

După cum au raportat Budnik et al. (18), veninul brut de Lycosa singoriensis conține peptide antimicrobiene (denumite licocitine 1, 2 și 3) care pot inhiba creșterea bacteriilor și ciupercilor gram-pozitive și gram-negative la concentrații micromolare. Prin urmare, am testat activitatea antimicrobiană a veninului brut atât împotriva celulelor procariote, cât și a celor eucariote, prin testul de inhibare a creșterii pe placă. În condițiile biotestelor noastre, tulpinile celulare cele mai sensibile la veninul brut au fost, în special, Bacillus subtilis și Staphylococcus sp, la care creșterea a fost puternic inhibată la 3 mg/mL. Veninul a acționat, de asemenea, puternic împotriva Corynebacterium glutamicum și Micrococcus luteus, dar slab împotriva uneia dintre tulpinile de ciuperci (Candida albicans). Cu toate acestea, veninul brut nu a avut niciun efect detectabil asupra E. coli și Saccaromyces cerevisae, chiar și la concentrația ridicată de 12 mg/mL (Figura 5 – B).

În ultimii zece ani, au fost identificate multe peptide antimicrobiene din veninul de păianjen. Licotoxinele I și II au fost identificate în veninul păianjenului lup Lycosa carolinensis. Ambele sunt peptide antimicrobiene liniare care prezintă caracterul α-helix amfipatic tipic peptidelor formatoare de pori. Mecanismul lor de formare a porilor a fost verificat în continuare prin promovarea efluxului de ioni de calciu din sinaptosomi (19). După licotoxine, s-a constatat că și cupienninele (20-22) și oxiopininele (23, 24), provenite din veninul păianjenului lup Cupiennus salei și, respectiv, Oxyopes kitabensis, au activități antimicrobiene. Mai recent, din veninul păianjenului Lachesana tarabaevi au fost purificate șapte noi peptide scurte și liniare antimicrobiene și citolitice numite latarcine. În plus, cinci noi peptide care împărtășesc o similitudine structurală considerabilă cu latarcinele purificate au fost prezise din baza de date cu etichete de secvență exprimată pentru glanda veninului de păianjen (25).

Aceste peptide din veninul de păianjen aparțin peptidelor antimicrobiene α-helicoidale cationice liniare. Această clasă de peptide antimicrobiene împărtășește unele caracteristici comune, cum ar fi inhibarea creșterii microbiene la concentrații micromolare scăzute și formarea de elice amfipatică și cationică în medii hidrofobe. În ultimele decenii, un număr mare de peptide antimicrobiene, inclusiv peptide antimicrobiene α-helicoidale cationice liniare, au fost descoperite atât la animale, cât și la plante. Aceste peptide sunt compuse, de obicei, din 12 până la 45 de aminoacizi și joacă roluri importante în sistemele imunitare înnăscute ale majorității organismelor vii (26-28). Cele mai multe dintre ele pot ucide microorganismele cu următoarele patru caracteristici: toxicitate selectivă, ucidere rapidă, spectre antimicrobiene largi și lipsa dezvoltării rezistenței (29-31).

În rezumat, raportăm noi descoperiri biochimice și farmacologice privind veninul păianjenului lup Lycosa singoriensis. Proprietățile distincte ale peptidelor acestui venin îl fac un model ideal pentru a studia mecanismele evolutive ale peptidelor veninului de păianjen. Studiul farmacologic al acestui venin este util pentru purificarea și caracterizarea peptidelor bioactive în studii ulterioare.

RECOMANDĂRI

Această lucrare a fost susținută de proiectele National Science Foundation (30430170 și 30700127).

1. Corzo G, Escoubas P. Toxine peptidice de păianjen active din punct de vedere farmacologic. Cell Mol Life Sci. 2003;60(11):2409-26.

2. Escoubas P. Molecular diversification in spider venoms: a web of combinatorial peptide libraries. Mol Divers. 2006;10(4):545-54.

3. King GF. Lumea minunată a păianjenilor: prefață la numărul special Toxicon privind veninul de păianjen. Toxicon. 2004;43(5):471-5.

4. Escoubas P, Rash L. Tarantule: farmaciști cu opt picioare și chimiști combinatori. Toxicon. 2004;43(5):555-74.

5. Escoubas P, Sollod B, King GF. Venom landscapes: mining the complexity of spider venoms via a combined cDNA and mass spectrometric approach. Toxicon. 2006;47(6):650-63.

6. Sollod BL, Wilson D, Zhaxybayeva O, Gogarten JP, Drinkwater R, King GF. Au fost arahnidele primele care au folosit biblioteci combinatorii de peptide? Peptide. 2005;26(1):131-9.

7. Tedford HW, Sollod BL, Maggio F, King GF. Păianjenii australieni cu pânză de pâlnie: maeștri chimiști de insecticide. Toxicon. 2004;43(5):601-18.

8. Lu DL, Zhang DF. Două tipuri de păianjeni otrăvitori din Xinjiang și prevenirea și vindecarea mușcăturii de păianjen. Chin J Zool. 2001;36(5):40-2.

8. Observație inițială privind obiceiul de viață al Lycosa singorensis. Chin J Zool. 2004;39:63-7.

10. Liu Z, Dai J, Dai J, Dai L, Deng M, Hu Z, Hu W, Liang S. Funcția și structura în soluție a huwentoxinei-X, un blocant specific al canalelor de calciu de tip N, de la păianjenul păsăresc chinezesc Ornithoctonus huwena. J Biol Chem. 2006;281(13):8628-35.

11. Bulbring E. Observații asupra preparatului izolat de diafragmă a nervului frenic la șobolan. Br J Pharmacol Chemother. 1946;1(1):38-61.

12. Liang SP, Chen XD, Shu Q, Zhang Y, Peng K. The presynaptic activity of huwentoxin-I, a neurotoxin from the venom of the Chinese bird spider Selenocosmia huwena. Toxicon. 2000;38(9):1237-46.

13. Guette C, Legros C, Tournois G,Goyffon M, Célérier ML. Profilarea peptidelor prin spectrometrie de masă cu desorbție laser asistată de matrice/ionizare time-of-flight a glandei veninului de tarantulă Lasiodora parahybana. Toxicon. 2006;47(6):640-9.

14. Liang S. An overview of peptide toxins from the venom of the Chinese bird spider Selenocosmia huwena Wang . Toxicon. 2004;43(5):575-85.

15. Liao Z, Cao J, Li S, Li S, Yan X, Hu W, He Q, Chen J, Tang J, Xie J, Liang S. Proteomic and peptidomic analysis of the venom from Chinese tarantula Chilobrachys jingzhao. Proteomică. 2007;7(11):1892-907.

16. Yuan C, Jin Q, Jin Q, Tang X, Hu W, Cao R, Yang S, Xiong J, Xie C, Xie J, Liang S. Proteomic and peptidomic characterization of the venom from the Chinese bird spider, Ornithoctonus huwena Wang. J Proteome Res. 2007;6(7):2792-801.

17. Endoh M. Un agonist al canalului Na+: un potențial agent cardiotonic cu un mecanism nou? Br J Pharmacol. 2004;143(6):663-5.

18. Budnik BA, Olsen JV, Egorov TA, Anisimova VE, Galkina TG, Musolyamov AK, Grishin EV, Zubarev RA. Secvențierea de novo a peptidelor antimicrobiene izolate din glandele veninoase ale păianjenului lup Lycosa singoriensis. J Mass Spectrom. 2004;39(2):193-201.

19. Yan L, Adams ME. Lycotoxine, peptide antimicrobiene din veninul păianjenului lup Lycosa carolinensis. J Biol Chem. 1998;273(4):2059-66.

20. Kuhn-Nentwig L, Dathe M, Walz A, Schaller J, Nentwig W. Cupiennin 1d: activitatea citolitică depinde de N-terminalul hidrofob și este modulată de C-terminalul polar. FEBS Lett. 2002;527(1-3):193-8.

21. Kuhn-Nentwig L, Muller J, Schaller J, Walz A, Dathe M, Nentwig W. Cupiennin 1, o nouă familie de peptide antimicrobiene foarte bazice în veninul păianjenului Cupiennius salei (Ctenidae). J Biol Chem. 2002;277(13):11208-16.

22. Pukala TL, Doyle JR, Llewellyn LE, Kuhn-Nentwig L, Apponyi MA, Separovic F, Bowie JH. Cupiennin 1a, o peptidă antimicrobiană din veninul păianjenului neotropical rătăcitor Cupiennius salei, inhibă, de asemenea, formarea oxidului nitric de către sintetaza neuronală a oxidului nitric. FEBS J. 2007;274(7):1778-84.

23. Corzo G, Villegas E, Gomez-Lagunas F, Possani LD, Belokoneva OS, Nakajima T. Oxyopinins, peptide amfipatice mari izolate din veninul păianjenului lup Oxyopes kitabensis cu proprietăți citolitice și cooperativitate insecticidă pozitivă cu neurotoxinele de păianjen. J Biol Chem. 2002;277(26):23627-37.

24. Nomura K, Corzo G. The effect of binding of spider-derived antimicrobial peptides, oxyopinins, on lipid membranes. Biochim Biophys Acta. 2006;1758(9):1475-82.

25. Kozlov SA, Vassilevski AA, Feofanov AV, Surovoy AY, Karpunin DV, Grishin EV. Latarcins, peptide antimicrobiene și citolitice din veninul păianjenului Lachesana tarabaevi (Zodariidae) care exemplifică diversitatea biomoleculară. J Biol Chem. 2006;281(30):20983-92.

26. Brogden KA. Peptide antimicrobiene: formatori de pori sau inhibitori metabolici în bacterii? Nat Rev Microbiol. 2005;3(3):238-50.

27. Brown KL, Hancock RE. Peptide cationice de apărare a gazdei (antimicrobiene). Curr Opin Immunol. 2006;18(1):24-30.

28. Zasloff M. Peptide antimicrobiene ale organismelor multicelulare. Nature. 2002;415(6870):389-95.

29. Matsuzaki K. De ce și cum sunt utilizate interacțiunile peptide-lipide pentru autoapărare? Magaininele și tachyplesinele ca arhetipuri. Biochim Biophys Acta. 1999;1462(1-2):1-10.

30. Mcphee JB, Hancock RE. Funcția și potențialul terapeutic al peptidelor de apărare a gazdei. J Pept Sci. 2005;11(11):677-87.

31. Mookherjee N, Hancock RE. Peptide cationice de apărare a gazdei: peptide de reglare a imunității înnăscute ca o nouă abordare pentru tratarea infecțiilor. Cell Mol Life Sci. 2007;64(7-8):922-33.

Corespondență către: D:
Songpiing Liang
Colegiul de Științe ale Vieții, Universitatea Normală Hunan
Changsha, Hunan, 410081, China.
Tel: +86 731 8872556. Fax: +86 731 8861304.
Email: [email protected].