Articles

Caracterizarea moleculară a xynX, o genă care codifică o xilanază multidomeniu cu un domeniu termostabilizator din Clostridium thermocellum

A fost clonată o genă din Clostridium thermocellum, xynX, care codifică o xilanază și a fost determinată secvența nucleotidică completă. Gena xilanazei din Clostridium thermocellum constă într-un ORF de 3261 nucleotide care codifică o xilanază (XynX) de 1087 de reziduuri de aminoacizi (116 kDa). Analiza secvențială a XynX a arătat o structură multidomeniu care constă din patru domenii diferite: un domeniu termostabilizator N-terminal omologat cu secvențe găsite în mai multe enzime termofile, un domeniu catalitic omologat cu familia 10 de glicozilhidrolaze, un domeniu duplicat de legare a celulozei (CBD) omologat cu familia IX CBD și un domeniu omologat triplicat al stratului S. Un mutant de deleție al xynX care are doar regiunea catalitică a produs o enzimă mutantă XynX-C care a păstrat activitatea catalitică, dar a pierdut termostabilitatea. În ceea ce privește timpul de înjumătățire la 70 °C, termostabilitatea XynX-C a fost de aproximativ șase ori mai mică decât cea a celeilalte enzime mutante, XynX-TC, produsă de un mutant care conține atât domeniul termostabilizator, cât și domeniul catalitic. Temperatura optimă a XynX-C a fost cu aproximativ 5-10 °C mai mică decât cea a XynX-TC.

.