Wzy-dependant path
Simon Bushell, Hexian Huang

As bactérias mais Gram-negativas contêm lipopolissacarídeo (LPS) como um componente principal da membrana externa. O LPS formado por uma âncora bem conservada, lipídio A, ligado a um polissacarídeo O-antigênio específico da estirpe hiper-variável (O-PS) (Stenutz et al, 2006) através de um oligossacarídeo de núcleo curto (Raetz & Whitfield, 2002). O LPS é muito importante para as interações com as defesas imunológicas do hospedeiro e a presença do O-PS desempenha um papel na resistência à matança mediada pelo complemento (Joiner, 1988). Até agora, apenas três tipos de sistemas de síntese bacteriana de glicanos foram descritos: a via dependente do Wzy-dependent, a via dependente da síntese e a via dependente do transportador de ATP (ABC) (Cuthbertson et al., 2010).
A exportação das cápsulas dos Grupos 1 e 4 é mediada por componentes da via de exportação dependente de Wzy- – uma rede de proteínas integradas ou associadas às membranas externas e internas das bactérias Gram-negativas que polimerizam e exportam as cápsulas com componentes citoplasmicamente sintetizados. O nosso laboratório já resolveu anteriormente a estrutura de cristal de raios X de Wza, a principal translocase dos componentes das cápsulas através da membrana externa. Também publicamos estruturas crio-EM de Wza em complexo com Wzc, uma membrana interna quinase que auxilia na polimerização de polissacarídeos capsulares.

A caracterização estrutural das proteínas que se localizam nas membranas biológicas é tradicionalmente um campo muito difícil de cristalografia protéica, uma vez que a sobreexpressão, solubilização e purificação das proteínas recombinantes da membrana são dificultadas pela sua elevada hidrofobicidade. Nosso laboratório se concentra em estratégias para superar esses obstáculos e aplicá-las em sistemas biológicos interessantes.