Abstract

Este estudo analisou o potencial de produção de Melissa officinalis L. usando cortes de haste. Quatro hormônios diferentes (IAA, IBA, NAA e GA3) foram aplicados aos cortes, com e sem gemas, em duas doses (1000 mg/L e 5000 mg/L), e após 60 dias, foram detectadas 10 características morfológicas de plantas recém-geradas, e foi realizada uma análise estatística. Os resultados do estudo mostram que as estacas com pelo menos uma gema devem ser usadas para produzir M. officinalis usando estacas de caule. Mesmo que as hormonas do grupo das auxiliares (IAA, IBA e NAA) não tenham um efeito aparente na percentagem de enraizamento, estas hormonas foram detectadas para afectar as características morfológicas das plantas recém-geradas, especialmente a geração de raízes. A aplicação do GA3 tem um efeito considerável na altura do caule.

1. Introdução

Bálsamo de limão (Melissa officinalis L.) pertence à família Lamiaceae e cresce amplamente no centro e sul da Europa e na Ásia menor . Também é encontrado em países tropicais (Brasil) onde é popularmente conhecido como erva-cidreira e Melissa . É uma erva aromática (limonada) perene, até cerca de 1 m de altura. As partes mais utilizadas são as folhas secas, muitas vezes com flores .

As folhas verdes aromatizadas de limão desta planta são utilizadas como folhas frescas, bem como na sua forma seca em saladas, molhos, sopas, com legumes e carne, e em sobremesas. Esta planta é utilizada na fabricação de certas bebidas alcoólicas e licores e é consumida como um chá de ervas. Também é utilizada como planta ornamental e como planta de fronteira, particularmente em jardins .

M. officinalis tem sido utilizada em diversas aplicações práticas na ciência médica. As folhas contêm óleos voláteis . A folha também contém compostos polifenólicos: derivados de ácido cafeico em grandes proporções, como ácido rosmarínico, compostos triméricos e alguns flavonóides .

M. officinalis pode modular uma série de medidas comportamentais, com indicações incluindo a administração como um sedativo leve, em sono perturbado, e na atenuação dos sintomas de distúrbios nervosos, incluindo a redução da excitabilidade, ansiedade e estresse . M. officinalis extractos podem atenuar os efeitos subjectivos do stress induzido em laboratório . Pode ser um medicamento herbal útil para o tratamento de espasmos gastrointestinais . M. officinalis L. tem uma atividade antiespasmódica e antimeteórica, como mostrado anteriormente em animais e seres humanos . Schnitzler et al. relataram que o óleo de M. officinalis pode ser adequado para o tratamento tópico de infecções herpéticas. Ele tem atividade receptora de acetilcolina no sistema nervoso central, com propriedades ligantes tanto nicotínicas quanto muscarínicas .

M. officinalis é vendido predominantemente em combinação com outras ervas, com, como ilustração, 49 produtos contendo bálsamo de limão no atual catálogo de medicamentos da indústria farmacêutica alemã “Rote Liste” (2001) . Desde a sua introdução moura na Espanha no século VII, o seu cultivo e uso espalhou-se por toda a Europa até à Idade Média. É cultivada em todo o mundo devido às suas propriedades culinárias .

Devido à sua importância económica, esta planta é produzida em grandes campos em vários países europeus como França, Alemanha, Bulgária e Roménia, bem como na América do Norte. Embora o bálsamo de limão se espalhe naturalmente na flora do nosso país, o seu nível de agricultura não é satisfatório, e ocasionalmente é recolhido da natureza e exportado .

Uma quantidade significativa do bálsamo de limão que é amplamente utilizado na Turquia é recolhida da flora natural. Isto inclui o cultivo do bálsamo de limão, que tem uma importância económica muito elevada e que evitará a destruição excessiva e sem sentido da flora natural, pelo menos até um certo ponto. Neste estudo, foi analisado o potencial de produção de M. officinalis L. usando estacas de caule. Para este fim, foram aplicados quatro hormônios diferentes aos cortes de caule em duas doses, e foi analisado o efeito de nove aplicações, juntamente com o grupo de controle, em 10 características morfológicas.

2. Materiais e Métodos

M. As estacas officinalis usadas nesta pesquisa foram coletadas no distrito de Daday da província de Kastamonu na Turquia. As estacas foram recolhidas a 8 de Setembro, hidratadas, e armazenadas na relva germinativa. As aplicações das estacas trazidas para o laboratório foram realizadas em 9 de setembro, como explicado a seguir.(a)Dois terços dos tubos de polietileno de 3 × 3 × 15 cm foram preenchidos com relva germinativa de Klasmann no laboratório.(b)As estacas foram cortadas a 2.As peças de 5 cm de comprimento foram cortadas com lancetas estéreis e agrupadas como estacas com e sem gemas.(c)Soluções de quatro hormônios diferentes em duas doses diferentes (1000 mg/L e 5000 mg/L) foram aplicadas às estacas, respectivamente, e nove grupos de aplicação foram criados, consistindo de oito grupos de aplicação de hormônios e um grupo controle. As aplicações foram realizadas imbruindo as estacas em hormônio por 4 a 5 minutos. Esta aplicação foi composta de 3 réplicas e 15 estacas em cada réplica (15 estacas com gemas, e 15 estacas sem gemas). Foram colocadas cinco estacas em cada tubo sem qualquer contacto, cobertas com aproximadamente 2 cm de relva germinativa, e hidratadas imediatamente. (d)Estes tubos foram colocados em caixas com orifícios à temperatura ambiente (20-25°C), não receberam luz solar directa e foram regados duas vezes por dia durante 60 dias. Quando a relva atingiu o ponto de saturação, não foi gerada acumulação de água, uma vez que os tubos e as caixas, os tubos foram colocados em furos de contenção, e a água excedente foi libertada. (e)As medições foram realizadas no dia 8 de novembro, que é o 60º dia do procedimento. A relva nos tubos foi vertida sobre uma bancada de laboratório, as raízes foram cuidadosamente limpas e o número de raízes foi definido. O comprimento médio das raízes foi medido utilizando uma microbússola digital. Após este procedimento, os caules e as folhas foram medidos. Todas estas medições foram realizadas utilizando uma microbússola digital com precisão de 0,01mm, e os resultados foram introduzidos numa tabela. Dez características morfológicas para cada corte foram definidas no final do estudo, incluindo percentagem de enraizamento (RP), comprimento do caule (SL), comprimento do caule sem ramo (SLB), diâmetro (SD), número de folhas (LN), comprimento das folhas (LL), tamanho da lâmina foliar (LS), largura da lâmina foliar (LW), número de raízes (RN), e comprimento da raiz (RL).

Análise de variância foi aplicada sobre os dados, utilizando o programa de embalagem SPSS 17.0. O teste Duncan foi aplicado para as características com pelo menos 95% de confiança estatística, e como resultado, grupos homogêneos foram adquiridos e interpretados.

Ao final do estudo, nenhuma nova haste foi formada nos cortes de haste sem gemas. Este resultado implica que as estacas com gemas devem ser utilizadas durante a produção de Melisa officinalis com estacas de caule. As aplicações hormonais em diferentes doses afectam as percentagens de germinação, assim como as características dos indivíduos germinados, a diferentes níveis. Os dados adquiridos com os resultados do estudo, os resultados da análise de variância aplicada sobre estes dados e o teste de Duncan são apresentados na Tabela 1.

Quando os valores indicados na tabela são analisados, nenhuma germinação é observada no hormônio IAA na dose de 5000 mg/L. Os maiores valores percentuais de germinação foram adquiridos com aplicações de 1000 mg/L IAA e 1000 mg/L GA3 de hormônio. Os valores adquiridos como resultado dessas aplicações são superiores aos valores de germinação adquiridos no grupo controle; entretanto, de acordo com os resultados do teste Duncan, esses valores estão no mesmo grupo homogêneo com o grupo controle. De acordo com os resultados do teste Duncan, o primeiro grupo homogêneo é composto pela aplicação na qual não foi observada germinação; aplicações de 1000 mg/L IAA e 1000 mg/L GA3 juntamente com o grupo controle são incluídas apenas no segundo grupo homogêneo, e as outras aplicações foram incluídas em ambos os grupos homogêneos.

De acordo com os valores indicados na tabela, surgiram diferenças significativas com um nível de dependência estatística de 95% entre as aplicações; no entanto, o nível de dependência estatística das diferenças surgidas de acordo com as outras características foi de 99,9%. Este resultado indica que, embora as aplicações hormonais não tenham revelado o efeito esperado sobre a percentagem de germinação, têm um efeito considerável sobre outras características.

Quando os valores indicados na tabela são analisados, observa-se que as plântulas mais longas, com 81,72 de comprimento de caule sem ramos e 96,75 de comprimento total de caule, foram produzidas com a aplicação de 5000 mg/L GA3. As plântulas produzidas no grupo controle têm 55,57 de comprimento total e 30,12 de comprimento total do caule sem galhos. Neste caso, o comprimento das plântulas de 5000 mg/L GA3 é 2,71 vezes maior que o do grupo de controle em termos de comprimento do caule sem ramos e 74% maior em comprimento total. Da mesma forma, o comprimento das plântulas de 1000 mg/L GA3 aplicadas é 87% maior que o das plântulas do grupo de controle, em termos de comprimento do caule sem ramos, e 38% maior em comprimento total. Entretanto, as plântulas produzidas como resultado de outras aplicações são mais curtas que o grupo de controle ou incluídas nos mesmos grupos homogêneos com o grupo de controle, de acordo com o resultado do teste Duncan.

Os maiores valores de diâmetro das mudas e número de folhas foram adquiridos com a aplicação de 5000 mg/L IBA; entretanto, um dos maiores valores do número de folhas foi obtido no grupo controle. Como resultado, pode-se concluir que as aplicações hormonais não têm efeito positivo, especialmente no número de folhas.

Quando se analisa o efeito das aplicações hormonais no tamanho da folha, observa-se que as aplicações IBA têm um efeito elevado no tamanho e largura da folha. Observou-se que as folhas expostas à aplicação de 1000 mg/L IBA são 55% mais longas e 45% mais largas em comparação com o grupo controle. As folhas expostas à aplicação de 5000 mg/L IBA são 31% mais longas e 44% mais largas do que o grupo controle. Observa-se que a aplicação de 5000 mg/L de IBA é altamente eficaz em termos de tamanho total das folhas. As folhas produzidas no grupo controle são 18,84 mm, enquanto que este valor é 27,38 mm na aplicação de 5000 mg/L IBA e 23,1 mm na aplicação de 5000 mg/L GA3, o que é altamente eficaz em termos de aumento do comprimento das mudas.

Apesar de o comprimento do caule ser um indicador importante da qualidade da muda, a relação raiz/tempo é muito importante para uma muda saudável. As mudas que podem gerar raízes peludas são geralmente aceites como sendo mais saudáveis, e as mudas que podem gerar raiz axial num curto espaço de tempo chegam mais facilmente às águas subterrâneas no ambiente natural, e assim, as suas hipóteses de sobrevivência aumentam.

De acordo, a geração de raízes é um dos mais importantes indicadores de qualidade das mudas. De acordo com os resultados do estudo, as mudas no grupo controle desenvolveram 2,67 raízes com comprimento médio de 10,32, enquanto as mudas que receberam a aplicação de 1000 mg/L IBA desenvolveram 4 raízes com comprimento médio de 54,02. As mudas que receberam a aplicação de 5000 mg/L IBA tiveram 5,5 raízes com um comprimento médio de 21,35. As mudas que receberam a aplicação GA3 de 5000 mg/L desenvolveram 4 raízes com um comprimento médio de 13,81.

Os resultados do estudo mostram que as aplicações hormonais têm um grande efeito no desenvolvimento radicular. O fato de que apenas o número de raízes das mudas desenvolvidas com a aplicação de 1000 mg/L GA3 é inferior ao do grupo controle, enquanto todas as aplicações desenvolveram raízes mais longas em comparação com o grupo controle, e as raízes das mudas desenvolvidas com a aplicação de 1000 mg/L IBA são mais de cinco vezes maiores do que as do grupo controle indica que as aplicações hormonais têm um grande efeito sobre o desenvolvimento radicular.

Os resultados do estudo demonstram que devem ser usadas estacas com pelo menos um gomo para produzir M. officinalis usando estacas de caule. Não se desenvolveram raízes nas estacas de caules sem gemas.

Os resultados das aplicações mostram que o grupo de hormonas auxiliares (IAA, IBA e NAA), objecto deste estudo, não têm um efeito aparente na taxa de enraizamento, mas têm um efeito nas características morfológicas das plantas recém-geradas. O desenvolvimento radicular, em particular, atingiu valores significativamente diferentes nas plantas que receberam o grupo de hormônios da auxina.

O processo de formação acidental da raiz é influenciado por uma série de fatores internos e externos. Entre os fatores internos, o papel mais importante é atribuído aos fito hormônios, especialmente as auxinas. É geralmente aceito que as auxinas têm um certo papel na iniciação do enraizamento. As auxinas controlam o crescimento e desenvolvimento das plantas, incluindo a iniciação radicular lateral e a resposta à gravidade radicular. Muitos estudos têm mostrado que a aplicação exógena de auxinas resulta em um aumento da iniciação das raízes laterais e que o desenvolvimento das raízes laterais é altamente dependente da auxina e do transporte da auxina .

Os efeitos do grupo de hormônios da auxina no enraizamento e desenvolvimento das plantas têm sido discutidos em vários estudos. Alvarez et al. analisaram a eficácia do IAA e IBA em Malus pumila; Štefančič et al. estudaram a eficácia do IAA e IBA em Prunus spp. assim como IBA e NAA em Pseudotsuga menziesii; Hossain et al. analisaram a eficácia da IBA na Swietenia macrophylla e Chukrasia velutina; Hussain e Khan analisaram a eficácia da IAA e IBA na espécie Rosa; Ozel et al. analisaram a eficácia da IAA e NAA na Centaurea tchihatcheffii; Chhun et al. pesquisaram a eficácia do IAA, IBA e NAA em Oryza sativa; De Klerk et al. analisaram a eficácia do IAA, IBA e NAA em Malus; Martin estudou a eficácia do IBA em Holostemma ada-kodien; Nordström et al. pesquisaram a eficácia da IAA e da IBA em Pisum sativum; Tchoundjeu et al. analisaram a eficácia da IBA em Prunus Africana; Swamy et al. estudaram a eficácia da IBA e da NAA em Robinia pseudoacacia e Grewia optiva. Os estudos mostram que, em geral, o grupo de hormônios da auxina tem um efeito sobre o enraizamento. Este resultado está em conformidade com os resultados deste estudo.

Gibberelinas estão em terceiro lugar com uma quota de 17% entre os hormônios herbais mais utilizados dentro dos reguladores naturais de crescimento das plantas. Comercialmente a giberelina mais comum é a GA3, e é usada para aumentar o comprimento da planta ou para aumentar o rendimento da planta. Os resultados do estudo revelam que o comprimento das mudas que recebem a aplicação de 5000 mg/L GA3 é 2,71 vezes maior que o do grupo de controle em termos de comprimento do caule sem ramos e 74% maior em comprimento total. Este resultado também está em conformidade com os resultados da literatura.

Efeito do GA3 no enraizamento também foi analisado em vários estudos. A eficiência do GA3 em Prunus avium L. e Prunus mahaleb foi analisada por Hepaksoy , por Aygün e Dumanoğlu em Cydonia oblonga, por Coşge et al. em Capparis ovata e Capparis spinosa, e por Selby et al. em Picea sitchensis. Entretanto, nenhuma eficiência aparente da GA3 no enraizamento foi detectada em várias espécies.