Het Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System maakt snelle en gemakkelijke colorimetrische meting van celproliferatie en levensvatbaarheid mogelijk in een 96-wells formaat, zonder radioactieve isotopen of organische oplosmiddelen. Het Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System is ook toepasbaar voor cytotoxiciteit en remmende assays, waarbij de kleurstofproductie eerder afneemt dan toeneemt.

De colorimetrische assay is gebaseerd op de splitsing van het tetrazoliumzout WST-1 tot een formazan-klasse kleurstof door mitochondriaal succinaat-tetrazoliumreductase in levensvatbare cellen. Naarmate de cellen groeien, wordt meer WST-1 omgezet in het formazanproduct. De hoeveelheid formazankleurstof staat in direct verband met het aantal metabolisch actieve cellen en kan worden gekwantificeerd door meting van de absorptie bij 420-480 nm (Amax 450 nm) in een multiwell plate reader.

Een moeiteloos protocol

Er zijn geen was-, oogst- of oplosbaarheidsstappen nodig met het Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System. De gehele procedure, van celkweek tot gegevensanalyse, kan worden uitgevoerd met een multiwell-plaatlezer in dezelfde 96-well-plaat.

Als uw cellen eenmaal zijn gekweekt, kan de assay in ongeveer 1 uur worden voltooid. Voeg gewoon het voorgemengde WST-1 celproliferatiereagens toe aan de plaat, kweek uw cellen gedurende ten minste 30 min in een bevochtigde atmosfeer (tot 4 uur, afhankelijk van celtype en -dichtheid) en meet de extinctie. Het gekleurde product wordt continu gegenereerd, zodat u de voortgang van uw experiment in de tijd kunt volgen door de plaat herhaaldelijk af te lezen en voor verdere ontwikkeling terug te plaatsen in de incubator. Dit elimineert giswerk en zorgt ervoor dat het optimale assay-eindpunt niet over het hoofd wordt gezien.

Stabiele reagentia

In tegenstelling tot traditionele WST-1 assayreagentia, die slechts drie dagen bij 4°C of een maand bij -20°C kunnen worden bewaard, is het Premixed WST-1 Cell Proliferation Reagent geformuleerd voor verhoogde stabiliteit: het kan twee weken bij 4°C of een jaar bij -20°C worden bewaard. Het wordt geleverd als een gebruiksklare oplossing die WST-1 en een elektronenkoppelingsreagens bevat, verdund in een steriele fosfaatgebufferde zoutoplossing.

Niet-radioactieve, colorimetrische assay

Veel celproliferatietests zijn gebaseerd op metingen van de radioactief gelabelde nucleoside-opname tijdens de DNA-synthese. De Premixed WST-1 Cell Proliferation Reagent assay is niet radioactief, wat het gemak en de veiligheid in het laboratorium ten goede komt. Bovendien is het Premixed WST-1 Cell Proliferation Reagent zeer goed oplosbaar in water vergeleken met andere tetrazoliumzouten die in soortgelijke assays worden gebruikt en die oppervlakteactieve stoffen of organische oplosmiddelen nodig kunnen hebben voor het oplossen.

Het Premixed WST-1 Cell Proliferation Reagent zal uw celproliferatie-assays vereenvoudigen en stroomlijnen. Het eenvoudige, één-oplossing protocol bespaart tijd en is gemakkelijk te gebruiken in een 96-well plaatformaat. Platen kunnen worden afgelezen en teruggebracht naar de incubator voor verdere ontwikkeling om time-course experimenten te vereenvoudigen.