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Geobacillus stearothermophilus 由来のラムノシルトランスフェラーゼWsaFにおける基質結合の構造的基盤 – University of St Andrews

TY – JOUR

T1 – Geobacillus stearothermophilus 由来のラムノシルトランスフェラーゼWsaFにおける基質結合の構造的基盤

AU – Steiner, Kerstin

AU – Hageluken, Gregor

AU – Messner, Paul

AU – Schaeffer, Christina

AU – Naismith, James Henderson

PY – 2010/3/26

Y1 – 2010/3/26

N2-糖質高分子材料は医学的にも工業的にも重要である. 多くのグラム陽性菌のS層はタンパク質と糖鎖高分子からなり、細胞表面でほぼ準結晶の配列を形成している。 この配列は細菌にとって重要であるだけでなく、商業的に重要な多糖類や複合糖質の製造に応用できる可能性がある。 Geobacillus stearothermophilus NRS 2004/3aのS層糖タンパク質糖鎖は、主に3つのラムノース糖がα-1,3-, α-1,2-, β-1,2-linkage によって連結した繰り返し単位から構成されている。 β-1,2-結合の形成は、酵素WsaFによって触媒される。 WsaFをはじめとする本経路の酵素は、他の酵素とほとんど相同性がないため、本経路の合理的な利用が妨げられている。 我々は、このようなラムノシルトランスフェラーゼとして初めてWsaFの構造および生化学的特性を明らかにした。 構造解析には、表面エントロピー低減法が用いられた。 この酵素は、アクセプター(成長するラムナン鎖)を結合するN末端ドメインと、基質(dTDP-β-L-ラムノース)を結合するC末端ドメインの2つのドメインを持っている。 WsaFとdTDPおよびdTDP-β-L-ラムノースの結合構造と生化学的解析から、触媒作用と基質認識の基盤となる残基が特定された。 また、部位特異的変異導入法により、アクセプター認識モデルを構築し、検証している。 (C) 2010 Elsevier Ltd. All rights reserved.

AB – 糖鎖高分子は医学的にも工業的にも重要である。 多くのグラム陽性菌のS層はタンパク質と糖鎖高分子からなり、細胞表面にほぼ準結晶の配列を形成している。 この配列は細菌にとって重要であるだけでなく、商業的に重要な多糖類や複合糖質の製造に応用できる可能性がある。 Geobacillus stearothermophilus NRS 2004/3aのS層糖タンパク質糖鎖は、主に3つのラムノース糖がα-1,3-, α-1,2-, β-1,2-linkage によって連結した繰り返し単位から構成されている。 β-1,2-結合の形成は、酵素WsaFによって触媒される。 WsaFをはじめとする本経路の酵素は、他の酵素とほとんど相同性がないため、本経路の合理的な利用が妨げられている。 我々は、このようなラムノシルトランスフェラーゼとして初めてWsaFの構造および生化学的特性を明らかにした。 構造解析には、表面エントロピー低減法が用いられた。 この酵素は、アクセプター(成長するラムナン鎖)を結合するN末端ドメインと、基質(dTDP-β-L-ラムノース)を結合するC末端ドメインの2つのドメインを持っている。 WsaFとdTDPおよびdTDP-β-L-ラムノースの結合構造と生化学的解析から、触媒作用と基質認識の基盤となる残基が特定された。 また、部位特異的変異導入法により、アクセプター認識モデルを構築し、検証している。 (C) 2010 Elsevier Ltd. All rights reserved.

KW – 結晶構造

KW – Geobacillus stearothermophilus

KW – ラムノシルトランスフェラーゼ

KW – S層タンパク質グリコシレーション

KW – 糖タンパク質糖鎖生合成

KW – 。 マンノシルトランスフェラーゼ・ピマ

KW – グリコーゲンシンターゼ

KW – 回折データ

KW – 遺伝子クラスター

KW – 。 ファミリーGT4

KW – 糖転移酵素

KW – 触媒

KW – 配列

http://www.scopus.com/inward/record.url?scp=77349090654&partnerID=8YFLogxK UR –

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