Voie dépendante de Wzy
Simon Bushell, Hexian Huang

La plupart des bactéries Gram-négatives contiennent du lipopolysaccharide (LPS) comme composant majeur de la membrane externe. Le LPS est formé d’un ancrage bien conservé, le lipide A, lié à un polysaccharide O-antigène (O-PS) spécifique à une souche hyper-variable (Stenutz et al, 2006) via un oligosaccharide central court (Raetz & Whitfield, 2002). Le LPS est très important pour les interactions avec les défenses immunitaires de l’hôte et la présence de O-PS joue un rôle dans la résistance à la mise à mort médiée par le complément (Joiner, 1988). Jusqu’à présent, seuls trois types de systèmes de synthèse des glycanes bactériens ont été décrits : la voie dépendante de Wzy, la voie dépendante de la synthase et la voie dépendante du transporteur ABC (ATP-binding cassette) (Cuthbertson et al., 2010).
L’exportation des capsules du groupe 1 et du groupe 4 est médiée par les composants de la voie d’exportation dépendante de Wzy – un réseau de protéines intégrées ou associées aux membranes externe et interne des bactéries Gram-négatives qui polymérisent et exportent les capsules composants synthétisés par le cytoplasme. Notre laboratoire a déjà résolu la structure cristalline aux rayons X de Wza, la principale translocase des composants de la capsule à travers la membrane externe. Nous avons également publié des structures cryo-EM de Wza en complexe avec Wzc, une kinase de la membrane interne qui aide à la polymérisation des polysaccharides capsulaires.

La caractérisation structurelle des protéines qui se localisent aux membranes biologiques est traditionnellement un domaine très difficile de la cristallographie des protéines, car la surexpression, la solubilisation et la purification des protéines membranaires recombinantes sont entravées par leur grande hydrophobie. Notre laboratoire se concentre sur les stratégies visant à surmonter ces obstacles et à les appliquer à des systèmes biologiques intéressants.