Le système de test de prolifération cellulaire WST-1 Premix permet une mesure colorimétrique rapide et facile de la prolifération et de la viabilité cellulaire dans un format de 96 puits, sans isotopes radioactifs ni solvants organiques. Le système de test de prolifération cellulaire Premix WST-1 est également applicable aux tests de cytotoxicité et d’inhibition, où la production de colorant diminue plutôt que d’augmenter.

Le test colorimétrique est basé sur le clivage du sel de tétrazolium WST-1 en un colorant de classe formazan par la succinate-tétrazolium réductase mitochondriale dans les cellules viables. Au fur et à mesure que les cellules prolifèrent, une plus grande quantité de WST-1 est convertie en produit formazan. La quantité de colorant formazan est directement liée au nombre de cellules métaboliquement actives et peut être quantifiée en mesurant l’absorbance à 420-480 nm (Amax 450 nm) dans un lecteur de plaques multipuits.

Un protocole sans effort

Aucune étape de lavage, de récolte ou de solubilisation n’est nécessaire avec le système de test de prolifération cellulaire Premix WST-1. Toute la procédure, de la culture des cellules à l’analyse des données, peut être réalisée avec un lecteur de plaques multipuits dans la même plaque à 96 puits.

Une fois que vos cellules sont cultivées, le test peut être réalisé en 1 heure environ. Il suffit d’ajouter le réactif de prolifération cellulaire WST-1 prémélangé à la plaque, de cultiver vos cellules pendant au moins 30 min dans une atmosphère humidifiée (jusqu’à 4 h, selon le type et la densité des cellules) et de mesurer l’absorbance. Le produit coloré est généré en continu, vous pouvez donc suivre l’évolution de votre expérience dans le temps en lisant à plusieurs reprises la plaque et en la replaçant dans l’incubateur pour un développement supplémentaire. Cela élimine les conjectures et garantit que le point final optimal du dosage n’est pas négligé.

Réactifs stables

Contrairement aux réactifs de dosage WST-1 traditionnels, qui ne peuvent être conservés que pendant trois jours à 4°C ou un mois à -20°C, le réactif de prolifération cellulaire WST-1 prémélangé a été formulé pour une stabilité accrue : il peut être conservé pendant deux semaines à 4°C ou un an à -20°C. Il est fourni sous forme de solution prête à l’emploi contenant du WST-1 et un réactif de couplage électronique, dilué dans une solution saline phosphatée stérile.

Dosage colorimétrique non radioactif

De nombreux dosages de prolifération cellulaire sont basés sur des mesures de l’absorption de nucléosides marqués radioactivement pendant la synthèse de l’ADN. Le dosage du réactif de prolifération cellulaire WST-1 prémélangé est non radioactif, ce qui améliore la commodité et la sécurité du laboratoire. En outre, le réactif de prolifération cellulaire WST-1 prémélangé est très soluble dans l’eau par rapport à d’autres sels de tétrazolium utilisés dans des tests similaires, qui peuvent nécessiter des tensioactifs ou des solvants organiques pour la dissolution.

Le réactif de prolifération cellulaire WST-1 prémélangé simplifiera et rationalisera vos tests de prolifération cellulaire. Le protocole simple, à une seule solution, permet de gagner du temps et est facile à utiliser dans un format de plaque à 96 puits. Les plaques peuvent être lues et renvoyées dans l’incubateur pour un développement ultérieur afin de simplifier les expériences en temps réel.