El sistema de ensayo de proliferación celular Premix WST-1 permite una medición colorimétrica rápida y sencilla de la proliferación y viabilidad celular en un formato de 96 pocillos, sin isótopos radiactivos ni disolventes orgánicos. El sistema de ensayo de proliferación celular Premix WST-1 también es aplicable a los ensayos de citotoxicidad e inhibición, en los que la producción de colorante disminuye en lugar de aumentar.

El ensayo colorimétrico se basa en la escisión de la sal de tetrazolio WST-1 a un colorante de tipo formazán por la succinato-tetrazolio reductasa mitocondrial en células viables. A medida que las células proliferan, se convierte más WST-1 en el producto formazán. La cantidad de colorante formazán está directamente relacionada con el número de células metabólicamente activas, y puede cuantificarse midiendo la absorbancia a 420-480 nm (Amax 450 nm) en un lector de placas multipocillo.

Un protocolo sin esfuerzo

Con el sistema de ensayo de proliferación celular Premix WST-1 no se requieren pasos de lavado, recolección o solubilización. Todo el procedimiento, desde el cultivo de las células hasta el análisis de los datos, puede llevarse a cabo con un lector de placas de múltiples pocillos en la misma placa de 96 pocillos.

Una vez cultivadas sus células, el ensayo puede completarse en aproximadamente 1 hora. Simplemente añada el reactivo de proliferación celular WST-1 premezclado a la placa, cultive sus células durante al menos 30 minutos en una atmósfera humidificada (hasta 4 horas, dependiendo del tipo y la densidad celular) y mida la absorbancia. El producto coloreado se genera de forma continua, por lo que puede controlar el progreso de su experimento a lo largo del tiempo leyendo repetidamente la placa y devolviéndola a la incubadora para su posterior desarrollo. Esto elimina las conjeturas y garantiza que no se pase por alto el punto final óptimo del ensayo.

Reactivos estables

A diferencia de los reactivos de ensayo WST-1 tradicionales, que sólo pueden almacenarse durante tres días a 4°C o un mes a -20°C, el reactivo de proliferación celular WST-1 premezclado ha sido formulado para una mayor estabilidad: puede almacenarse durante dos semanas a 4°C o un año a -20°C. Se suministra como una solución lista para usar que contiene WST-1 y un reactivo de acoplamiento de electrones, diluido en una solución salina estéril tamponada con fosfato.

Análisis colorimétrico no radiactivo

Muchos ensayos de proliferación celular se basan en mediciones de la captación de nucleósidos marcados radiactivamente durante la síntesis de ADN. El ensayo del reactivo de proliferación celular Premixed WST-1 no es radiactivo, lo que aumenta la comodidad y la seguridad del laboratorio. Además, el reactivo de proliferación celular WST-1 premezclado es altamente soluble en agua en comparación con otras sales de tetrazolio utilizadas en ensayos similares, que pueden requerir tensioactivos o disolventes orgánicos para su disolución.

El reactivo de proliferación celular WST-1 premezclado simplificará y agilizará sus ensayos de proliferación celular. El sencillo protocolo de una sola disolución ahorra tiempo y es fácil de utilizar en un formato de placa de 96 pocillos. Las placas pueden leerse y devolverse a la incubadora para su posterior desarrollo, lo que simplifica los experimentos de curso temporal.